Livestock Research for Rural Development 32 (4) 2020 LRRD Search LRRD Misssion Guide for preparation of papers LRRD Newsletter

Citation of this paper

L’influence des extraits phénoliques d’un sous-produit oléicole ‘liquide’ sur la fermentation ruminale in vitro du foin de triticale

Aouadi Abdelhafid1,2 et Arhab Rabah2

1 Département de Biologie, Faculté des Sciences Exactes et des Sciences de la Nature et de la Vie, Université Ghardaïa, Algérie Zone scientifique, BP 455 Ghardaia, 4700, Algérie
aouadi@univ-ghardaia.dz
2 Département de Biologie, Faculté des Sciences Exactes et des Sciences de la Nature et de la Vie, Université Larbi Ben Mhidi, Oum-El-Bouaghi, Algérie

Résumé

Le but de ce travail est valoriser les composes phénoliques des déchets liquides des huileries ’margines’ en l'alimentation de betail. Pour cela cette étude s’intéressera à évaluer l’influence des extraits phénoliques bruts des margines issues de déférents modes de trituration (continus et discontinus) de variété d’olive (Cornicabra) sur la fermentation ruminale in vitro du foin (Triticum aestivum).

L’extraction de l’huile d’olive par la méthode traditionnelle à presse, produit un résidu aqueux plus riche en composés phénoliques (19,6 g/litre) que lors de l'utilisation du procédé d’extraction continue moderne (11,6 g/litre). L’addition des extraits phénoliques à une incubation in vitro du foin de triticale a augmenté la production totale de gaz et la digestibilité du DM, réduit la population de protozoaires et réduit le pourcentage de méthane dans le gaz, les effets étant beaucoup plus importants pour les extraits phénoliques des margines issue de procédé d’extraction discontinus.

Mots clés: azote ammoniacal, digestibilité, gaz, margines, méthane, polyphénols, protozoaires


The effect of the phenolic extracts from olive mill waste-water on the in vitro rumen fermentation of Triticale (Triticum aestivum) straw

Abstract

The purpose of this study was to evaluate the effect of the crude phenolic extracts of the liquid residues resulting from deferent extraction modes (continuous and discontinuous) of one variety of olive (Cornicabra) on thein vitro rumen fermentation of Triticale straw (Triticum aestivum).

The extraction of olive oil by the traditional press method resulted in an aqueous residue richer in phenolic compounds (19.6 g/liter) than when the modern continuous extraction process is used (11.6 g/liter). Addition of the phenolic extracts to an in vitro rumen incubation of Triticale straw increased the total gas production and the DM digestibility, reduced the population of protozoa and decreased the methane percentage in the gas with the effects being much greater when the extracts were produced by the discontinuous process. These results indicate the possibility of using the phenolic extracts from olive oil processing as feed additives for ruminants and especially the reduction of rumen methanogenesis.

Keywords: ammoniacal nitrogen, ciliate protozoa, digestibility, gas, polyphenols


Introduction

L’industrie oléicole, en plus de sa production principale qui est l’huile laisse deux résidus, l’un liquide (les margines) et l’autre solide (les grignons). Sachant qu’en moyenne 100 kg d’olives traitées engendrent 100 litres de margines, 1 mètre cube de margine équivaut à la pollution engendrée par 1200 habitants (Nefzaoui 1991). Leur effet nocif dérive en grande partie de leur contenu en composés phénoliques qui peuvent inhibé la croissance des micro-organismes (Capasso 1997). Ces considérations ont conduit plusieurs chercheurs à l’échelle nationale et internationale à choisir la voie du traitement et de la valorisation des margines pour limiter leur pollution.

Pour cela ce travail aura pour but de valoriser ce résidu par l’utilisation de leurs composes phénoliques comme des additifs dans l’alimentation des bétails. Les margines retenues pour la présente étude sont issues de déférents modes de trituration (continus et discontinus) de variété d’olive (Cornicabra) collectées dans la région de Ghardaïa située au centre de la partie Nord de Sahara de l’Algérie. Donc cette étude s’intéressera à évaluer l’impact des extraits phénoliques bruts des margines sur la fermentation ruminale in vitro du foin de Triticale ( Triticum aestivum) et spécialement la production de méthane.


Matériels et méthodes

Matériel

Les margines sont prélevés à partir d’olives de varitie de Cornicabra. Ces olives sont pressées dans deux huileries : une traditionnell: nour a la nour de la région de El Guerrara, (32047' 25.01''N 4 0 29' 18.68'' E) 120 km environ à l'est de wilaya de Ghardaïa ; et la deuxième moderne (03 phase) : de la région de Belghanem (32 029'10.09''N 3038'35.35''E) dans la wilaya de Ghardaïa située au centre de la partie Nord de Sahara de l’Algérie. Le foin de triticale (Triticum aestivum) est été retenu comme substrat standard de référence (témoin), Il a été collecté à la ferme Habib à Mansoura, Ghardaïa, Algerie.

Tableau 1. Les caractéristiques biochimique du foin de triticale (g/kg)

Maître sèche

885

Matières minérale

55.9

Proteines

95.3

Cellulose

212

Mat grasses

24.3

NDF

509

ADF

283

Pour l’étude de la digestion in vitro, le contenu de rumen est prélevé de 3 ovins, choisis de manière aléatoire, d’âge et de sexe différents, sacrifiés aux abattoirs de Metlili (32016'25.50''N 30 37'43.51''E) 20 km environ à sud de la wilaya de Ghardaïa. Le prélèvement d’inoculum se fait directement après l’abattage des animaux, il est immédiatement transporté au laboratoire où il est traité.

Méthodes
Extraction et dosage des composés phénoliques

Pour l’extraction les composés phénoliques en utilisant l’acétate d’éthyle comme un solvant (Visioli et al 1999 ; De Marco et al 2007). Les composés phénoliques ont été dosés par la méthode colorimétrique en utilisant le réactif de Folin-Ciocalteu et le dosage des tanins totaux est effectué indirectement après qu’ils sont absorbés aux molécules de PVPP. Les résultats sont exprimés en équivalant d’acide tannique (Makkar et al 1993 ; FAO/IAEA 2000). Les teneurs en tanins condensés sont déterminées par la méthode au Butanol-HCl (Makkar 2000 ; FAO/IAEA 2000). La quantification du contenu flavonoique est estimée par la méthode d’AlCl3 (Fievez et al 2005).

Fermentations in vitro des substrats

La fermentation des substrats est étudiée par la technique de production de gaz in vitro suivent les étapes mentionnées par Menke et al (1979) et Menke et Steingass (1988). La fermentation est réalisée dans des seringues en polypropylène de 60 ml de capacité. Chaque extrait phénolique (100µl) est mélangé avec le foin de triticale 200 mg). Après la fermentation, les paramètres qui' ont été suivis, sont:

Le comptage des protozoaires ciliés est réalisé selon la méthode décrite par Ogimoto et Imai (1981). Le dénombrement est réalisé sur une cellule de Malassez. L’azote ammoniacal (N-NH3) est dosé par une technique colorimétrique (Chaney et Marbach 1962).

Le coefficient de digestibilité apparente est calculé après une centrifugation (12000 tours /min pendant 20 min) du contenu de chaque seringue, le culot est séché à 105° C pendant 72 heures puis pesé.

CUDa % = msi – (msrs – msrb) * 100 /msi

(msi : matière sèche initiale, msrs : matière sèche résiduelle du substrat incubé et msrb: moyenne des matières sèches résiduelles des seringues témoins).

Analyse statistique

Les données sont traitées par une analyse de la variance à un seul facteur (mode d’extraction) par le logiciel statistique STATISTICA version 10. Les moyennes sont classées selon la classification de Test de Newman-Keuls (α = 5%).


Résultats et discussion

Composés phénoliques

Le tableau 2 montre que, la quantité de composés phénoliques présents dans les margines augmente de 70% dans la méthode d’extraction discontinus. Nos résultats concordent avec ceux trouvés par plusieurs auteurs (Hamdi et al 1991, Hamdi et Garcia 1991, Hamdi et Garcia 1993).

Tableau 2. Valeurs moyennes (g/L) pour les composés phénoliques dans les margines issues du procédé d’extraction continu (EC) ou discontinu (EC) des olives

EC

ED

SEM

p

Phénols totaux

11.6

19.6

0.0260

<0.001

Tanins totaux

8.00

12.0

0.0892

<0.001

Tanins condensés

4.20

5.09

0.0157

<0.001

Flavonoïdes

0.222

0.347

0.0064

<0.001

La variation entre les procédés d’extraction est relative à la dilution due à l’ajout d’eau au moment de l’extraction de l’huile d’olive. Les conditions climatiques aride de notre région Ghardaïa exigent l’équipe de huilerie à presse d’ajouter une quantité d’eau hors de les normes, ça explique la grande concentration des phénols totaux dans le procédé d’extraction à presse, car les polyphénols sont solubles dans l’eau (Fki et al 2005). La teneur élevé en phénols totaux est largement dépendante de pouvoir d’extraction de l’acétate d’éthyle et selon Allouche et al (2004) les margines "liquides" contiennent 53% des composés phénoliques initialement présents dans les olives (2% seulement dans l’huile et environ 45% dans les grignons sec) (Rodis et al 2002).

Effet des composés phénoliques sur la fermentation in vitro

L’addition des extraits phénoliques a augmenté la production totale de gaz et la digestibilité du DM, et a réduit le pourcentage de méthane dans le gaz (tableau 3), les effets étant beaucoup plus importants lorsque les extraits étaient produits par le procédé discontinu. L’explication de ces changements peut être due à la réduction de la population de protozoaires ciliés, qui sont causée par les tanins dans les extraits phénoliques brut des margines. La diminution de nombre des protozoaires est principalement liée à l’effet des tanins sur les protozoaires (Getachew et al 2000). À son tour, la diminution du nombre des protozoaires ciliés entraînerait une augmentation de la population bactérienne, ce qui entraînerait une augmentation de la production de gaz et de la digestibilité du substrat. La réduction du méthane pourrait être due aux effets communs de l’action des tanins dans les extraits des margines et à l’effet indirect de la diminution des protozoaires ciliés (Nguyen et al 2020). Ainsi, il est connu que les bactéries méthanogènes se retrouvent généralement liés intiment aux protozoaires ciliés, dont l’élimination par des complexe avec les tanins conduit forcément à une réduction de la méthanogènes de 35 à 45% (Blummel et Ørskov 1993). la diminution de l’ammoniac du rumen est un autre résultat attendu de la reduction du nombre des protozoaires ciliés (Nguyen et al 2020).

La différence entre les résultats de deux modes de l’extraction d’olive est principalement due à la quantité des composées phénoliques dans les margines issu de modes d’extraction discontinu (19.6 g/l) sont plus grande que la quantité des composées phénoliques dans les margines issu de modes d’extraction continu (11.6 g/l).

Tableau 3. Influence des extraits phénoliques des margines (M) sur la production de gaz, % méthane, pH, N-NH3 et protozoaires ciliés

 

Foin

Foin +
Mdisc.

Foin +
Mcont.

SEM

p

Substrate, mg MS

200

219

219

   

Gas production, ml

4h

7.00 c

16.0 a

11.3 b

1.44

<0.001

8h

12.8 b

23.8 a

18.3 b

2.58

<0.001

24h

24.8

38.2

33.3

2.75

<0.001

CH4 a las 24h, %

25.0 a

18.4 b

23.2a

0.795

<0.001

CH4 a las 24h, ml

6.20 c

7.03 b

7.73 a

0.082

0.0017

CUD, %

61.0 c

71.4 a

64.9 b

1.37

<0.001

CH4, ml/g CUD

50.7 a

44.8 b

54.2 a

5.06

0.0061

pH

6.51

6.45

6.44

0.002

0.292

N-NH3, mg/L

6.16 a

4.20 b

2.73 c

0.514

0.003

Protozoaires ciliés#

20.0 a

13.7 b

16.3 ab

3.56

0.017

abc : les lettres différentes dans une rangée sont différentes a p <0.05
# *10-3/ml



Figure 1. Cinétique modélisée de la production de gaz des mélanges
du foin de triticale et des extraits des margines


Conclusion


Références bibliographiques

Allouche N, Feki I and Sayadi S 2004 Toward a high yield recovery of antioxidants and purified hydroxytyrosol from olive mill waste waters. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 52, 267-273

Blümmel M and Ørskov E R 1993 Comparison of gas production and nylon bag degradability of roughages in predicting feed intake in cattle. Anim. Feed Sci. Technol. 40, 109-119.

Capasso R 1997 The chemistry, biotechnology and ecotoxicology of the polyphenols naturally occurring in vegetable wastes. Current Tropical Phytochemistry., Resesrtsh Trends,1 :145-156

Chaney A L and Marbach E P 1962 Modified reagents for determination of urea and ammonia. Clinical Chemistry. 8:130–132 http://webpages.icav.up.pt/ptdc/CVT/098487/2008/Chaney,%201962.pdf

De Marco E, Savarese M, Paduano A and Sacchi R 2007 Characterization and fractionation of phenolic compounds extracted from olive oil. Food chemistry, 104 : 858-867

FAO/IAEA 2000 Quantification of tannins in tree foliage. A Laboratory Manual http://www.iaea.org/programmes/nafa/d3/index.html.

Fievez V, Babayemi O J and Demeyer D 2005 Estimation of direct and indirect gas production that requires minimal laboratory facilities Anim. Feed. Sci. Technol. 123:197-210

Fki I, Allouche N and Sayadi S 2005 The use of polyphenolic extract, purified hydroxytyrosol and 3,4-dihydroxyphenyl acetic acid from olive mill wastewater for the stabilization of refined oils: a potential alternative to synthetic antioxidants. Food Chemistry, 93: 197-204

Getachew G, Makkar H P S and Becker K 2000 Tannins in tropical browses: Effects on in vitro microbial fermentation and microbial protein synthesis in media containing different amounts of nitrogen. Journal of Agricultural and Food Chemistry1, 48 : 3581-3588.

Hamdi M and Garcia J L 1991 Comparison between anaerobic filter and anaerobic contact process for fermented olive mill wastewaters Biores. Technol, 38, 23-29 https://horizon.documentation.ird.fr/exl-doc/pleins_textes/pleins_textes_6/b_fdi_33-34/36491.pdf

Hamdi M, Khadir A and Garcia J 1991 The use of Aspergillus niger for the bioconversion of olive mill waste-waters. Appl Microbiol Biotechnol 34, 828–831 https://horizon.documentation.ird.fr/exl-doc/pleins_textes/pleins_textes_5/b_fdi_31-32/34643.pdf

Hamdi M and Garcia J L 1993 Anaerobic digestion of olive mill wastewaters after detoxification by prior culture of Aspergillus niger. Process Biochem., 28, 155-159 https://horizon.documentation.ird.fr/exl-doc/pleins_textes/pleins_textes_6/b_fdi_35-36/41231.pdf

Jouany J P 1994 Les fermentations dans le rumen et leur optimisation INRA Prod. Anim. 7 (3) : 207-225 https://hal.archives-ouvertes.fr/hal-00896087/document

Makkar H P S 2000 Recent advances in the in vitro gas method for evaluation of nutritional quality of feed resources. Animal Production and Health Section Joint FAO/IAEA Division International Atomic Energy Agency Vienna(Austria) http://www.fao.org/tempref/docrep/fao/007/y5159e/y5159e02.pdf

Menke K H, Raab L, Salewski A, Steingass H, Friz D and Schneider W 1979 The estimation of the digestibility and metabolisable energy content of ruminant feedstuffs from the gas production when they are incubated with rumen liquor in vitro. J. Agri. Sci. Casab.92: 217-222

Menke K H and Steingass H 1988 Estimation of the energetic feed value obtained from chemical analysis and in vitro gas production using rumen fluid, Anim. Res. Dev.28: 7-55

Nefzaoui A 1991 Valorisation des sous-produits de l’olivier. Optiom Méditerranéennes , 16: 101-108 http://citeseerx.ist.psu.edu/viewdoc/download?doi=10.1.1.605.3522&rep=rep1&type=pdf

Nguyen S H, Thi Nguyen H D and Hegarty R S 2020 Defaunation and its impacts on ruminal fermentation, enteric methane production and animal productivity. Livestock Research for Rural Development. Volume 32, Article #60. http://www.lrrd.org/lrrd32/4/nghson32060.html

Ogimoto K and Imai S 1981 Atlas of Rumen Microbiology. Japan Scientific Society Press. Tokyo. Japan

Rodis P S, Karathanos V T and Mantzavinou A 2002 Partitioning of olive oil antioxidants between oil and water phases. Journal of Agricultural Food and Chemistry, 50, 596-601

Visioli F, Romani A, Mulinacci N, Zarini S, Conte D and Vincieri F 1999 Antioxidants and other biological activities of olive mill waste waters. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 47 : 3397-3401


Received 22 February 2020; Accepted 23 March 2020; Published 1 April 2020

Go to top