Facteurs de variations de la qualité du spermogramme du lapin reproducteur

A Najjar and M Ben Mrad

Institut National Agronomique de Tunisie
amelnajarbenmatoug@yahoo.fr

Résumé

L’objectif de l’étude a consisté à étudier l’influence du mois au printemps et du rang de la récolte sur la qualité de la semence (spermogramme) des lapins reproducteurs de souche INAT. Le sperme de sept lapins reproducteurs a été récolté avec un vagin artificiel et analysé. Le jour de la récolte 2 prélèvements espacés de 15 minutes ont été effectués. Durant la récolte, le déroulement de l’éjaculation du mâle a été suivi. Immédiatement après la récolte, les analyses effectuées ont intéressé les paramètres macroscopiques tels que le volume de l’éjaculat (VE), le volume du gel (VG), le volume du sperme et le pH de la semence ; et ses paramètres microscopiques tels que la motilité massale (MM), la motilité individuelle (MI), le pourcentage de spermatozoïdes morts (%SM), le pourcentage de spermatozoïdes anormaux (%SA) et la concentration en spermatozoïdes (C). L’analyse de la variance a été réalisée en utilisant le logiciel SAS.

Les résultats ont montré que le mois de la saison a affecté le pourcentage d’échec d’éjaculation, le VG, le pH, la MM, la MI, le %SA et la C  (P<0,05). En outre, on a trouvé que le rang de la récolte n’a affecté que le VE, le VG et la C (P<0,05). Les paramètres étudiés ont aussi varié selon les mâles (p<0,01) parmi lesquels trois ont eu un sperme de bonne qualité. Il ressort de cette étude que la variation du spermogramme de ces reproducteurs devrait affecter leur fertilité ainsi que le nombre de femelles inséminées, et par conséquent, une variation de leurs paramètres de production.

Mots-clés: lapin, mois au printemps, rang du prélèvement, sperme

Variations in the quality of sperm in rabbits

Abstract

The objective of the study was to investigate the influence of the month in spring and the rank of the collection on the quality of the semen of INAT rabbit bucks. The semen of seven bucks was collected by an artificial vagina and analyzed twice weekly. Two samples spaced of 15 minutes were performed. During collection, buck reproduction behavior was studied. Immediately after collection, semen evaluation interested macroscopic parameters (volume of ejaculate: VE, of gel: VG, sperm volume: SV and pH), and microscopic parameters (mass motility: MM, individual motility: MI, percentage of dead sperm: % SM, percentage of abnormal sperm: % SA and sperm concentration: C). Analysis of variance was performed using SAS software.

The results showed that the month of the season affected the percentage of failure of ejaculation, VG, pH, MM, MI, %SA and C (P <0.05). In addition, we found that the rank of the collection affects only the VE, VG and C (P <0.05). Semen parameters varied also according to bucks including three of which had a good quality of sperm. (p<0.01) It seems that the quality of semen bucks could affect their fertility, the number of inseminated females, and thereafter increase variation in their production parameters.

Key-words: bucks, month in spring, rank of collection, sperm

Introduction

L’élevage cunicole occupe une importante place économique et sociale en Tunisie. La production de viande de lapin a été estimée à 2 555 tonnes en 2007 dont la plus grande partie (1 775 tonnes) a été apportée par l’élevage cunicole industriel (GIPAC 2008). Cependant, cette production connaît des variations liées à des facteurs environnementaux, aux performances de reproduction et de production des lapines reproductrices, ainsi qu’à la qualité de la semence des mâles reproducteurs. Cette dernière, déterminée à partir du spermogramme, est un facteur primordial dans les élevages utilisant l’insémination artificielle, qui elle-même est susceptible de variations diverses (Najjar et al 2009). En effet, la variation de la qualité de la semence du lapin affecte sa fertilité, le nombre de femelles inséminées et la production cunicole. L’objectif de cette étude vise à étudier le spermogramme des lapins reproducteurs et à déterminer les variations de sa qualité en fonction du mois de la saison printanière et du rang de la récolte.

Matériel et méthodes

Animaux et récoltes de semence 

L’expérience a eu lieu dans le clapier de l’Institut National Agronomique de Tunisie entre le mois de mars et le mois de mai. La semence de sept lapins reproducteurs de souche INAT, âgés de 10 mois en moyenne, a été récoltée avec un vagin artificiel et en présence d’une femelle boute –n-train en chaleur (Boussit 1989). Le rythme de récolte de la semence utilisée a été de 2 fois par semaine espacées de 72 heures. Le jour de la récolte 2 éjaculats  ont été prélevés de chaque mâle et espacés de 15 minutes (prélèvements 1 et 2). La température et l’humidité dans le bâtiment ont été enregistrées par un thermohygromètre. Durant la récolte, le comportement de l’éjaculation du mâle a été noté (Vastarde 1987).

Evaluation du spermogramme  

Immédiatement après la récolte, le volume de l’éjaculat (VE) a été apprécié par lecture de la graduation du tube collecteur. Le volume de la fraction du gel (VG) a aussi été noté. Le volume du sperme (VS) est déduit après élimination du VG. Le tube collecteur a été mis immédiatement dans un bain-marie à 37°C. Le pH de la semence est déterminé par un pH-mètre. Ensuite, les motilités massale (MM) et individuelle (MI) des spermatozoïdes ont été déterminées sous microscope à contraste de phase. La motilité massale a été appréciée en plaçant une goutte de semence pure entre lame et lamelle observée au grossissement (X10). Une note a été attribuée au mouvement de la masse des spermatozoïdes observés selon l’échelle de Petitjean (Boussit 1989). La motilité individuelle a été appréciée après dilution de la semence avec le dilueur GALAP (IMV, France) à raison de ½ semence et ½ dilueur en volumes. Une goutte de semence diluée a été observée entre lame et lamelle au grossissement (X40). Une note a été attribuée au mouvement individuel des spermatozoïdes observés selon l’échelle d’Adrieu (Boussit 1989).

Le pourcentage de spermatozoïdes morts (%SM) a été déterminé par la préparation d’un frottis utilisant la coloration vitale éosine-nigrosine : une goutte de semence diluée dans GALAP a été mélangée avec une goutte du colorant, puis le mélange a été étalé délicatement le long de la lame. Le frottis a été laissé quelques secondes sur la plaque chauffante à 37°C, puis il a été observé sous microscope au grossissement (X40). Les spermatozoïdes morts laissent diffuser le colorant à travers leur membrane endommagée, alors que les spermatozoïdes vivants avec leurs membranes fonctionnelles ne laissent pas diffuser le colorant et restent par conséquent incolores. Un comptage au hasard de 150 spermatozoïdes a été effectué le long du frottis parmi lesquels on a distingué les spermatozoïdes morts des vivants (Boussit 1989).

La concentration (C) en spermatozoïdes (en millions/ml) a été déterminée en utilisant une cellule de Thoma à partir d’une goutte de semence diluée au 1/5^ème avec une solution de formaldéhyde à 0,9%. Le comptage a été effectué sous le microscope au grossissement (X40) (Boussit 1989).

Le pourcentage de spermatozoïdes anormaux (%SA) a été étudié sur le même échantillon de semence de la cellule de Thoma. 150 spermatozoïdes ont été comptés au hasard parmi lesquels on a distingué les spermatozoïdes anormaux (Boussit 1989).

Analyses statistiques  

Les données ont été analysées par le logiciel SAS (version 9). L’analyse de la variance a été effectuée par la procédure GLM (General Linear Model). Le test Duncan a été utilisé pour la comparaison des moyennes des paramètres du spermogramme en fonction des facteurs étudiés. Le seuil de signification a été considéré pour p <0,05. 

Résultats et discussion

Effet du mois de la saison  

Le pourcentage d’échec d’éjaculation a été plus élevé au mois de mai par rapport aux mois d’avril et mars (83% vs 74% et 60% ; Figure 1). Cela a coïncidé aussi avec une hausse de la température et de l’humidité du bâtiment, respectivement 22°C et 72,5% (vs 18°C et 65% pour le mois de mars et 19°C et 66,5% pour le mois d’avril). Ce résultat est en accord avec celui de Fielding (1992) qui a rapporté que le comportement du lapin est sensible à l’augmentation des facteurs d’ambiance dans le bâtiment d’élevage, en particulier à l’humidité relative.  Toutefois, Deprés et al (1994) ont écrit que la libido du lapin ainsi que la quantité et la qualité de sa production spermatique ont été améliorés lorsque la durée de l’éclairement était plus longue (16 heures de lumière vs 8 heures de lumière par jour).

Figure 1: Pourcentage d’échec d’éjaculation des reproducteurs en fonction du mois

Les résultats ont montré que seuls le VG et le pH de la semence ont varié en fonction du mois (Tableau 1). Boussit (1989) indique que le volume de l’éjaculat atteint ses valeurs élevées du mois de mars jusqu’au mois de juin. Concernant le VG, il a été démontré chez l’étalon, que ce paramètre varie en fonction de la saison (Clément et al 1998). Le pH de la semence augmente du mois de mars jusqu’au mois de mai pour atteindre une valeur alcaline. Ceci est dû à l’augmentation des sécrétions des glandes vésiculaires qui augmentent nettement pendant la saison printanière (Rigal 2008).

La concentration en spermatozoïdes (Figure 2) a augmenté du mois de mars (118 millions de spermatozoïdes/ml) au mois de mai (729 millions de spermatozoïdes/ml ; p =0,0001). Cette variation est sans doute en relation avec l’augmentation de la durée du jour d’une part, et de la température du bâtiment d’élevage (22°C) d’autre part (Boiti et al 2005).

Figure 2: Variation de la concentration en spermatozoïdes de la semence des lapins reproducteurs en fonction du mois de la saison printanière

La MM et la MI (Tableau 2) des spermatozoïdes ont augmenté du mois de mars au mois de mai (2 et 1 vs 4 et 2 ; P <0,05). Le %SA a été plus élevé au mois d’avril (51%) par rapport à celui obtenu au mois de mars (33%) et au mois de mai (24%) (p <0,05). Cependant, le %SM n’a pas varié en fonction du mois de la saison.

Effet du rang de la récolte  

Les résultats (Tableau 3) ont montré que le VE et le VG de la semence ont varié en fonction du rang du prélèvement (p<0,05). En effet ces deux derniers ont diminué dans le prélèvement 2. Ceci est en accord avec les travaux de Ben Cheikh (1993) et Alvarino (2000) qui ont rapporté que l’ordre de la récolte affecte en particulier le volume de l’éjaculat. De plus, nos résultats ont montré aussi la concentration en spermatozoïdes a augmenté dans le prélèvement 2 (p<0,05). Cela est vrai puisque la concentration  est corrélée négativement avec le volume de l’éjaculat (Ben Cheikh 1993). Etant donné que le volume du sperme ne varie pas contrairement à la concentration, il en résulte que la semence obtenue dans le prélèvement 2 permet un nombre de dose d’insémination plus important et par conséquent peut inséminer un nombre plus élevé de lapines.

Effet du mâle 

Les résultats ont montré que tous les paramètres  du spermogramme ont varié en fonction des mâles sauf pour le VG (p <0,01). La C, la MM et la MI ont été plus élevées chez les lapins 2, 4 et 7 (Tableau 4). Cependant, le %SM a été plus élevé chez le lapin 3 et 6, et le %SA a été aussi plus élevé chez les lapins 2 et 3. Lebas (1996) a cité que la qualité du sperme du lapin est influencée par l’origine génétique, l’alimentation et les conditions d’ambiance dans le bâtiment d’élevage. Dans ce cas, et tenant compte des résultats obtenus pour les paramètres C, MM et MI, les lapins 4 et 7 ont eu un sperme de bonne qualité, ainsi que le sperme du lapin 1 peut être considéré acceptable. 

Conclusion

• Bien que le pourcentage d’échec d’éjaculation a augmenté en fonction du mois de la saison printanière, les éjaculats obtenus ont montré que les paramètres du spermogramme des lapins reproducteurs de souche INAT ont été améliorés d’une part avec le mois de la saison printanière, en particulier pour les paramètres volume du gel, pH, motilité massale, motilité individuelle et concentration en spermatozoïdes ; et d’autre part avec le rang du prélèvement pour les paramètres volume de l’éjaculat, du gel et la concentration en spermatozoïdes. De plus, la qualité du sperme de 3 lapins parmi les sept étudiés a été considéré bonne. Par conséquent, par l’amélioration de la qualité de la semence de ces reproducteurs on pourrait améliorer aussi leur fertilité lorsqu’ils sont utilisés dans un programme d’insémination artificielle et augmenter le nombre de femelles inséminées, entraînant ainsi une variation de leurs paramètres de production.  Le mois de mai est le meilleur pour inséminer les lapines au printemps dans nos conditions.

Références

Alvarino J 2000 Reproduction performance of male rabbits. 7ème congrès mondial de cuniculture. World Rabbit Sciences, 8 suppl 1, Valencia, Espagne, 13-35.  

Ben Cheikh N 1993 Production de sperme et fertilité du lapin mâle Oryctolagus cuniculus : Effet de la fréquence de collecte et du type génétique. Thèse d’état, Ecole Nationale Agronomique de Toulouse. 142p  

Boiti C, Castellini C, Theau-Clément M, Besenfelder U, Liguori L, Renieri T and Pizzi F 2005 Guidelines for the handling of rabbit bucks and semen. World Rabbit Science, 13: 71-91. http://www.wrs.upv.es/files/guides/irrgmachos.pdf 

Boussit D 1989 Reproduction et insémination artificielle en cuniculture. Association française de cuniculture, INRA, Lempdes, France, 234p. 

Clément F, Plongere G, Magistrini M et Palmer E 1998 Appréciation de la fonction sexuelle de l’étalon. Le point vétérinaire, 29 (191) : 61-66. 

Deprés E, Théau-Clément M et Lorvelec O 1994 Influence de la durée d’éclairement sur les perforformances de reproduction de lapines nullipares élevées en Guadeloupe. World Rabbit Sciences, 2(2), 53-60. 

Fielding D 1992 Le lapin. Le technicien de l’agriculture tropicale, Maisonneuve et Larose, Paris, France, 144p. 

GIPAC  2008. Volailles de Tunisie: numéro spécial secteur cunicole. Revue Technique et Economique du Secteur Avicole, 40 :43. 

Lebas F 1996 La biologie du lapin. Chapitre 7.2 Reproduction : Le mâle. http://www.cuniculture.info/Docs/Biologie/biologie-07-2.htm#haut 

Najjar A, Rouatbi M et Ben Mrad M 2009 Le rythme de récolte affecte-t-il le spermogramme du lapin et la fertilité des lapines ? In Proc : 16^èmes journées scientifiques sur les résultats de la recherche agricole, 2 et 3 décembre 2009, Nabeul, Tunisia. 16 : 336-343. 

Rigal F 2008 Comparaison de la qualité de la semence de taureaux collectés à l’électro-éjaculateur ou au vagin artificiel. Thèse pour obtenir le grade de docteur vétérinaire. Ecole Nationale Vétérinaire de Toulouse, 99p, France. http://oatao.univ-toulouse.fr/4343/1/rigal_4343.pdf  

Vastarde F M 1987 Spacing behavior of free-ranging domestic rabbits (Oryctolagus cuniculus). Applied Animal Behaviour Science, 18(2): 321-326.

Received 24 March 2013; Accepted 3 July 2013; Published 1 August 2013

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