Posibles factores nutricionales, alimenticios y metabólicos que limitan el uso del nitrógeno en la síntesis de proteínas lácteas en hatos lecheros de Antioquia

H J Correa C

Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Sede Medellín
hjcorreac@unalmed.edu.co

Resumen

La leche que se produce en las zonas frías del departamento de Antioquia (Colombia) presenta una muy baja concentración de proteína poniendo en riesgo la competitividad de estos sistemas de producción frente a los mercados internacionales. Con la finalidad de establecer las causas nutricionales, alimentacias y metabólicas implicadas en el uso del nitrógeno en la síntesis de proteínas lácteas, se revisó la información generada bajo estas condiciones y aquella que permitieran explicar la baja concentración de la proteína en la leche.

La información presentada permite establecer el nivel de comprensión que se tiene sobre el metabolismo del nitrógeno en vacas lactantes bajos los sistemas de alimentación que predominan en los hatos de lechería especializada en Antioquia.

Palabras clave: aminoácidos, amonio, ciclo de la urea, degradabilidad ruminal, eficiencia nutricional

Possible nutritional and metabolic factors limiting the use of dietary nitrogen in the synthesis of milk proteins in  dairy herds on pastures mainly of Kikuyu grass (Pennisetum clandestinum)

Abstract

The milk produced in cool regions of Antioquia (Colombia) has a very low protein concentration putting in risk the competitiveness of this animal production systems in the national and international markets. The aim of this review was to establish the nutritional, alimentary and metabolic factors related with the nitrogen use in the synthesis of milk protein under the Antioquia dairy production conditions. The information reviewed can establish the comprehensive level of nitrogen metabolism in lactating cows under the predominating feeding systems in specialized dairy herds of Antioquia.

Key words: amino acids, rumen degradability, ammonia, urea synthesis, nutritional efficiency

Introducción

Debido a que en Colombia existe una gran variedad de climas, topografía, infraestructura y condiciones culturales, se han configurado diversos sistemas de producción de leche (Aldana 1990). Siendo los más importantes los de doble propósito y de lechería especializada. Estos últimos, ubicados en las zonas de trópico alto (región andina), aportan más del 50% de la producción total de leche del país (Osorio 2004) y se caracterizan por un uso más intensivo de tecnología en comparación con el doble propósito (Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural 1999) y por que la leche producida presenta un menor contenido de proteína (Pérez 2000).

Puesto que se ha reconocido que la calidad composicional de la leche, particularmente en lo que tiene que ver con el contenido de proteína, es un factor determinante en el logro de la competitividad de estos sistemas de producción (Pérez 2000; Doepel et al 2004; Rulquin et al 2004), el bajo contenido de proteína en la leche obtenida en los sistemas de producción de lechería especializada pone en riesgo su competitividad frente a los mercados nacionales e internacionales. Muchos países en el mundo han desarrollado esquemas diferenciales de pago de la leche con los que se estimula el contenido de proteína por encima del de grasa. Así, por ejemplo, en Francia la relación entre el precio de la proteína verdadera de la leche a grasa ha cambiado de 0.8 a 2.5 durante la última década (Rulquin et al 2004) En Colombia, por su parte, la cooperativa COLANTA, la procesadora de leche más importante del país, ha venido modificando el esquema de pago de la leche al productor mediante un sistema de bonificaciones en el que la proteína recibe un mejor precio que la grasa (Castro 2004).

Meneses (2005) analizó 1050 datos de 42 hatos lecheros del oriente y norte de Antioquia y encontró un promedio de 3.13 ± 0.14% en el contenido de proteína en la leche mientras que Londoño et al (2005) analizando 905 muestras provenientes del municipio del Santuario, al oriente de Antioquia, encontraron un promedio de 2.97 ± 0.11% para esta variable. Este bajo contenido de proteína estaría asociado a la menor eficiencia en el uso del nitrógeno de la dieta para la síntesis de proteínas lácteas (EFIC) en comparación con los valores reportados en otras latitudes: así, mientras que Alcaráz et al (2001), Delgado (2003), Betancur y Trujillo (2004) y Saldarriaga y Soto (2004) trabajando en el oriente antioqueño reportaron EFIC de 14.8, 16.9, 16.1 y 19.2%, respectivamente, Jonker et al (1998) indican que bajo las condiciones de alimentación en ganado de leche que predomina en los Estados Unidos, esta EFIC oscila entre 21.1 y 38%. Lapierre et al (2005) por su parte, encontraron que en promedio, la EFIC en los sistemas de producción de leche en zonas templadas es de 31% oscilando entre 22 y 44%.

Una menor EFIC necesariamente trae repercusiones negativas tanto en lo ambiental (Knowlton 1998; Lapierre et al 2005), como en lo metabólico (Correa y Cuellar 2004; ), reproductivo (Butler 1998; Correa 2002), productivo (Van Horn et al 1994) y económico (Vandehaar 1998; Hanigan 2005) de tal manera que en la medida en que exista mayor claridad sobre los factores implicados en el uso del nitrógeno de la dieta para la síntesis de proteínas lácteas, mayores serán las probabilidades de mejorar este parámetros y reducir los impactos negativos asociados a la ineficiencia en el uso del nitrógeno.

Esto implica realizar un examen minucioso de todo el proceso que va desde el contenido mismo y composición de las proteínas de los alimentos ofrecidos a los animales, hasta el metabolismo de los aminoácidos en la glándula mamaría y la posterior síntesis de proteínas lácteas, esto es, el consumo de proteínas, la degradación ruminal de las proteínas de los alimentos, la síntesis de proteína microbiana, el flujo ruminal tanto de la proteína microbiana como de la proteína no degradada en el rumen, la digestión intestinal de las proteínas, la absorción de aminoácidos y péptidos, así como el uso metabólico de aminoácidos y péptidos en el intestino, hígado y tejidos extrahepáticos y extramamarios.

La información con que actualmente se cuenta sobre la manera en la que operan estos procesos bajo los sistemas especializados de producción de leche que predominan en Antioquia, es muy limitada. Sin embargo, es posible a partir de esta información plantear algunas hipótesis que podrían explicar la baja EFIC reportada en estos sistemas y, con base en estas proponer algunos enfoques experimentales que bien podrían contribuir a aclarar el panorama del metabolismo del nitrógeno en estos sistemas de producción.

Contenido de proteína y aminoácidos en pastos y suplementos alimenticios

Los sistemas de producción bovina en Colombia están basados en el pastoreo de forrajes de muy diversa calidad nutricional (Aldana 1990). En Antioquia la situación no es muy diferente, particularmente en las zonas de lechería especializada: la mayor parte de estas zonas se encuentran en pastos de bajo potencial productivo como la grama (Cynodon sp), la falsapoa (Holcus lanatus) y el azul orchoro (Dactylis glomerata), aunque hay porcentajes cada vez mayores de pastos de mejor calidad como el kikuyo (Pennisetum clandestinum) y en menor porcentaje, ryegrass (Lollium perenne), a los que se les da un manejo en pastoreo rotacional o en franjas con cerca eléctrica y son sometidos a intensos programas de fertilizados química, particularmente con fertilizantes nitrogenados (Consejo Regional Lácteo 2001).

Algunos trabajos han permitido demostrar que el nivel de fertilización, particularmente la nitrogenada, afecta la calidad nutricional de los forrajes. En general, la fertilización nitrogenada conduce a un incremento en el contenido de N en el forraje (Carulla 1999;  Rodríguez 1999; Messman et al 1992; Minson 1990; Van Vuuren et al 1991) aunado a un incremento en el N soluble y el nitrógeno no proteico (NNP). Los datos presentados en la tabla 1 indican que el contenido de proteína cruda (PC) del pasto kikuyo es muy alto no siendo raros los valores que superan el 20% de la materia seca (MS). Recientemente Read y Fulkerson (2003) señalaron que cuando el nivel de N en el pasto kikuyo supera el 3.5 de la MS (lo que equivale al 22% de PC como porcentaje de la MS), el contenido de nitratos, uno de los principales componentes del NNP, se incrementa dramáticamente.

La información sobre el contenido de aminoácidos del pasto kikuyo es muy escasa. Echeverry y Parra, (2001) reportaron el contenido de aminoácidos de este pasto en cuatro muestras con diferente contenido de PC tomadas en un hato lechero del municipio de Envigado (Antioquia). En la figura 1 se aprecia la concentración de aminoácidos de este pasto como porcentaje de la MS.

Como se puede observar en esta figura, y como era de esperarse, existe una clara relación entre el contenido de PC de la muestra y su contenido de aminoácidos. El contenido de la mayoría de los aminoácidos esenciales de este pasto, es menor que el encontrado en la proteína bacteriana del rumen (Clark et al 1992) (figura 2).

En la figura 3 se observa más claramente esta relación. Como se puede apreciar, los aminoácidos esenciales con menor concentración relativa en el pasto kikuyo son en su orden, lisina, metionina, isoleucina, treonina, leucina, arginina y valina. Solamente el contenido de fenilalanina e histidina en el pasto kikuyo superan el encontrado en la proteína bacteriana del rumen. Esto es de suma importancia no solo por el hecho de que este pasto es el más utilizado en los sistemas de producción intensiva de leche en Antioquia y otras zonas del país, si no, además por el hecho de que, como se verá más adelante, este pasto representa un porcentaje relativamente alto de la dieta de las vacas lactantes.

Considerando la composición de aminoácidos del pasto kikuyo en comparación con el de la proteína microbiana, no sería aventurado afirmar que sería más provechoso para el animal hospedero que la proteína de este pasto se degradara completamente en el rumen y se transformara en proteína microbiana y reducir el escape de la misma hacia el duodeno, dado que la proteína microbiana posee un perfil de aminoácidos esenciales mucho mejor que el que presenta este pasto.

El contenido de proteína en los alimentos comerciales que se suministran en los hatos lecheros de Antioquia, es otro elemento importante a tener en cuenta en la caracterización de estos sistemas de producción. Por lo general, el contenido de PC en estos alimentos es superior al que requieren los animales y al mínimo que se garantiza en la etiqueta del producto. Es así como Montoya y Pino (2002) encontraron que el contenido de PC del alimento comercial utilizado para suplementar las vacas del trabajo experimental que adelantaron fue de 21.7% cuando la etiqueta del producto indicaba un mínimo de 18% de la MS. Por su parte, Rueda y Taborda (2003) reportaron que la concentración de PC en el alimento comercial utilizado fue de 22.8% cuando el mínimo garantizado en la etiqueta era también del 18%.

Los altos contenidos de PC tanto en la base forrajera (pasto kikuyo) como en los suplementos alimenticios utilizados en los sistemas intensivos de producción de leche en Antioquia, indican que presumiblemente existe un exceso en la concentración de esta fracción en las dietas ofrecidas a las vacas cuando se comparan con los requerimientos establecidos por el NRC (2001). Según este informe, los requerimientos de PC en las dietas para vacas en producción superan el 20% de la MS solamente en animales con producciones superiores a los 30 litros vaca/día en las dos primeras semanas de lactancia y con contenidos de proteína en la leche superiores al 3.5%. Este no es el caso de los sistemas de producción de leche en Antioquia, ni siquiera en las primeras etapas de la lactancia. El pobre perfil de aminoácidos esenciales en el pasto kikuyo, por otro lado, indica una limitación en su aporte hacia el duodeno en la fracción no degrada en el rumen.

Consumo de materia seca y de proteína

La concentración de PC y aminoácidos en los alimentos ofrecidos en los hatos lecheros, no es suficiente para apuntalar hipótesis sobre su uso por parte los animales. El consumo de estas fracciones es de capital importancia. No son muchos los trabajos en los que se halla evaluado el consumo de pastos y suplementos alimenticios en los sistemas de producción de leche en Antioquia. En la tabla 2 se presenta un resumen de la información obtenida sobre el CMS en cuatro trabajos realizados en la Universidad Nacional de Colombia, sede Medellín, mientras que en la tabla 3 se encuentran los datos correspondientes al consumo de PC.

Estos trabajos se realizaron bajo condiciones de estabulación suministrando pasto kikuyo al libre voluntad y pesando el forraje y el suplemento suministrado y rechazado.

Como se puede apreciar en la tabla 2, el CMS proveniente del forraje osciló entre 1.7 y 2.47 veces el CMS proveniente de los suplementos alimenticios, lo que equivale a decir que el CMS proveniente del forraje correspondió entre el 62.5% (Alcaráz et al 2001) y 71.0% (Betancur y Trujillo 2004) del CMS total.

El CPC proveniente del forraje (tabla 3) varío entre 57.6% (Delgado 2002) y 75.9% (Betancur y Trujillo 2004), indicando que, en general, el pasto kikuyo hace los mayores aportes de PC en la dieta de las vacas lactantes en estos sistemas de producción de leche en Antioquia y dado que, como fue señalado previamente, el perfil de aminoácidos esenciales de este pasto es de menor calidad que el que estaría aportando la proteína bacteriana del rumen, es de esperarse que la proteína no degradable en el rumen (PNDR) de este pasto haga un pobre aporte de aminoácidos en el duodeno.

Degradabilidad ruminal de la proteína

Los estudios de degradabilidad ruminal de la proteína tanto de los forrajes como de los suplementos alimenticios utilizados en los sistemas de producción de leche en Antioquia, se han realizado mediante la técnica de degradabilidad in situ (Ærskov y McDonald 1979).

En la tabla 4 se muestran los parámetros de cinética ruminal y los valores de PDR y PNDR en muestras de pasto kikuyo y de suplementos alimenticios utilizados para la alimentación de ganado de leche en Antioquia. Los parámetros de cinética ruminal y la estimación de la PDR y la PNDR se realizaron con base en las ecuaciones propuestas por Ørskov y McDonald (1979) asumiendo una kp de 0.05/h.

Se puede apreciar que, en general, la PDR en el pasto kikuyo es menor que la que presentan los suplementos alimenticios, aunque en estos últimos la variabilidad es mayor. Así mismo se aprecia que, exceptuando los valores reportados por Correa y Marín (2002) para la muestra con 18.6% de PC, la PDR en este pasto supera el 50% de la PC.

Parcelas de pasto kikuyo de las que obtuvieron los datos reportados por Soto y Valencia (2004), fueron utilizadas por Betancur y Trujillo (2004) y por Soto y Saldarriaga (2004) en sus trabajos experimentales. Al utilizar esta información y aquella presentada en la tabla 3, se calculó el consumo de PDR y PNDR a partir del pasto kikuyo y el suplemento alimenticio utilizado en cada experimento. Estos datos se presentan en la tabla 5.

En la tabla 5 se puede apreciar que, en general, el consumo de PDR a partir del forraje supera el consumo de esta fracción proveniente de los suplementos aunque existe una gran variabilidad entre los datos. Es así como en el trabajo de Saldarriaga y Soto (2004) el consumo de PDR a partir del forraje fue 2.57 veces el consumo a partir del suplemento, lo que equivale a aproximadamente el 72% de la PDR consumida total, en tanto que en el de Delgado (2002) el consumo de PDR del pasto kikuyo correspondió a aproximadamente el 50% del consumo total.

En la tabla 6 se muestran los requerimientos de PDR y PNDR de las vacas experimentales utilizadas por Delgado (2002), Betancur y Trujillo (2004) y Saldarriaga y Soto (2004), estimados mediante el modelo NRC (2001). En esta tabla se observa que el consumo total de PDR en todos los casos excedió los requerimientos, aunque en el trabajo de Delgado(2002) este exceso fue muy ligero representando solo el 5.2% del requerimiento.

En los trabajos de Betancur y Trujillo (2004) y Saldarriaga y Soto (2004), estos excesos representaron el 26.7 y el 19.9%, del requerimiento, respectivamente. Es de esperarse que estos excesos de PDR signifiquen un problema para su transformación en proteína microbiana nivel ruminal como se discutirá más adelante.

El consumo de PNDR a partir del pasto kikuyo, por otro lado, fue siempre mayor que el consumo a partir de los suplementos alimenticios. Es así como en el trabajo de Delgado (2002) la PNDR del forraje representó casi el 75% del total de PNDR consumida mientras que en el de Betancur y Trujillo (2004) este porcentaje fue de 87.8% y en el de Saldarriaga y Soto (2004) esta cifra fue del 80.4%. Estos datos estarían indicando un aporte muy importante de una proteína de baja calidad ya que como se señaló previamente el perfil de aminoácidos esenciales de la proteína del pasto kikuyo es de menor calidad que la de la proteína microbial (Clark et al 1992).

De lo anterior se desprende que el contenido de PDR en el pasto kikuyo y, particularmente, en los suplementos alimenticios, son altos lo que hace que el aporte sea mayor que los requerimientos indicando la presencia de graves problemas en la nutrición proteica en estos sistemas de producción de lechería especializada.

Síntesis de proteína microbiana en el rumen

Ha sido reportado que la proteína microbiana sintetizada en el rumen puede aportar más del 50% de los aminoácidos que alcanzan el intestino (Dijktra et al 1998). El perfil de aminoácidos esenciales de la proteína microbiana verdadera es más ajustado al contenido de aminoácidos de la leche que el que presentan algunas fuentes proteicas utilizadas en la alimentación de ganado de leche como son la torta de soya, la harina de pescado y el gluten de maíz (Santos et al 1998). Aún así, presenta limitaciones en su contenido de leucina, isoleucina, valina y arginina. A pesar de ello, se ha considerado que la proteína microbiana es una buena fuente de aminoácidos para el animal (Verbic 2002). Debido a la importancia que esto representa en la nutrición de los rumiantes, se hace necesario establecer los mecanismos que afectan su síntesis bajo las condiciones de producción que predominan en Antioquia.

En la actualidad no existen trabajos en los que se halla estimado la síntesis de proteína microbiana en el rumen bajo las condiciones de alimentación que predominan en las zonas lecheras de Antioquia. Sin embargo, con base en las características nutricionales de los alimentos suministrados a los animales así como en el sistema de alimentación utilizado, es posible establecer algunas hipótesis al respecto.

Ha sido reconocido que tanto la energía como el N disponible en el rumen son los principales factores nutricionales que afectan la síntesis de proteína microbiana en el rumen (Clark et al 1992). De estas dos fracciones, sin embargo, parece ser la energía el factor más limitante (Verbic 2002). Basados en esta idea se han propuesto algunos modelos para predecir la síntesis de proteína microbiana en el rumen. Así, el NRC (2001) estima que cuando la energía en el factor limitante, la síntesis de proteína microbiana en el rumen equivale al 13% de los nutrientes digestibles totales corregidos por el consumo de materia seca (NDT_corr) en tanto que cuando la PDR es el factor limitante, la síntesis de proteína microbiana equivale al 85% de la PDR. Basados en la primera aproximación, Rueda y Taborda (2003) estimaron que la síntesis de proteína microbiana en el rumen de un grupo experimental de vacas lactantes que produjeron 13.35 ± 4.5 kg/vaca/día de leche y consumieron 7.61 ± 1.24 kg/vaca/día de NDT_corr fue 0.986 ± 0.161 kg/vaca/día.

La síntesis de proteína microbiana, sin embargo, no depende únicamente del aporte de energía en sí: la fuente de energía es aún más importante. Clark et al(1992) afirman que la mejor fuente de energía es una mezcla de carbohidratos estructurales (FDN) y no estructurales (CNE). Se ha señalado que la concentración de CNE en las raciones para vacas lactantes debe estar entre 35 y 40% de la MS (Grant 1996; NRC 2001; Stokes 1997) en tanto que la concentración de FDN debe corresponder a alrededor del 30% de la MS (NRC 2001). Los datos de la tabla 1 muestran, sin embargo, que la concentración de FDN en el pasto kikuyo es superior al 55% de la MS y que la concentración de CNE, en el mejor de los casos, no llega al 18% de la MS. La concentración de FDN en los suplementos alimenticios, por otro lado, no compensa los desbalances del pasto kikuyo (tabla 7). Así, mientras que el promedio de la FDN es ligeramente más alto que lo recomendado, los CNE son más bajos.

De otro lado, ha sido señalado que el contenido de PDR en las dietas para vacas lactantes deberá oscilar entre el 10 y el 12% de la MS (Mahanna 1997; NRC 2001) con lo que la relación CNE : PDR, debe estar entre 3.2 y 3.5 : 1.0 para garantizar el adecuado suministro de energía y N para la síntesis de proteína microbiana en el rumen. Dicha relación fue de 1.83 en el caso del suplemento alimenticio utilizado por Rueda y Taborda (2003), de 2.72 en el del trabajo de Bernal y Montoya (2002) y de 2.74 en el del experimento de Correa y Marín (2002). El pasto kikuyo, por su parte, presenta valores inferiores a 1.3 para esta relación. Esto significa que bajo condiciones de alimentación basadas en este tipo de forrajes y de suplementos alimenticios existe una gran limitación para la síntesis de proteína microbiana tanto por los excesos de PDR como por las deficiencias en CNE.

Esta situación tiende a agudizarse cuando se tiene en cuenta la falta de sincronía en el aporte de los sustratos para la síntesis de proteína microbiana en el rumen. Como fue señalado previamente, el pasto kikuyo hace los mayores aportes de PDR a la dieta de las vacas lactantes en los sistemas de alimentación que predominan en Antioquia, mientras que el aporte de CNE es muy limitado dada su baja concentración. Por el contrario, los suplementos alimenticios se caracterizan por presentar un mayor contenido de CNE y por hacer menores aportes de PDR a la dieta. El suministro de estos suplementos, sin embargo, se realiza durante el ordeño, varias horas después de que el máximo consumo del forraje se ha alcanzado (figura 4) (Agudelo y Puerta 2004).

La figura 4 muestra que el porcentaje de animales pastoreando fue alto entre las 4:00 y 6:00 p. m. (> a 70%), medio entre las 8:00 y 10:00 a. m. (entre 50 y 70%) y bajo entre las 11:00 y 12:00 m. (< a 50%). Los ordeños se realizan, sin embargo, a la 1:00 p.m. y 3:00 a.m., cuando el consumo de MS a partir del forraje es restringido. Sin embargo, ha sido resaltada la importancia que tiene la sincronía en el ingreso de las fuentes energéticas y proteicas al rumen sobre la fermentación ruminal y la síntesis proteína microbiana (Herrera-Saldaña et al 1990; NRC 2001; Vaughan et al 2002). En su trabajo, Vaughan et al (2002) encontraron que los niveles de nitrógeno ureico en la sangre (NUS) de vacas Holstein lactantes presentó una concentración más alta en los animales que fueron alimentados con un ración parcialmente mezclada una hora más tarde de haber terminado el pastoreo (POST), que aquellas vacas que fueron alimentadas con esta ración dos horas antes de dar inicio al pastoreo (PRE). Según los autores la menor concentración de NUS en las vacas PRE estaría indicando mayor captura de N amoniacal en la síntesis de proteína microbiana. Por su parte Montoya et al (2004) trabajando en un hato lechero de San Pedro de los Milagros (Antioquia) encontraron que la suplementación con 6.0 ó 12.0 kg/día de papa cruda (Solanum tuberosum) a vacas Holstein lactantes durante el pastoreo de pasto kikuyo, redujo la concentración de nitrógeno ureico en leche (NUL) y mejoró tanto la producción de leche como de proteínas lácteas indicando, presumiblemente, una mejor utilización de las proteínas del pasto kikuyo en la síntesis de proteína microbiana (tabla 8).

Estos resultados refuerzan la tesis de que bajo las condiciones de alimentación que predominan en los hatos lecheros de Antioquia, la síntesis de proteína microbiana se encuentra limitada en el aporte sincrónico y suficiente de CNE y que esta falta de sincronía sería parcialmente responsable de las altas concentraciones de nitrógeno ureico en sangre (NUS) y en leche y los bajos contenidos de proteína en la leche.

Formación y absorción de amonio ruminal

El aporte asincrónico e insuficiente de CNE en el rumen con relación al aporte de PDR, implica que el producto final de la fermentación de las proteínas, el amonio, se estaría produciendo en altas cantidades y a tasas superiores a la capacidad que tendría la población microbiana de incorporarlo en proteína microbiana. Esto significa que cantidades importantes de amonio se estarían absorbiendo por la pared ruminal. Ya Leng y Nolan (1984) habían advertido hace más de dos décadas que la producción de amonio en el rumen a partir de la desaminación de las proteínas, se constituye en una de las principales causas de la ineficiencia en la retención de nitrógeno en los rumiantes. Eschenlauer et al (2002) son más contundentes al señalar que la excesiva producción de amonio en el rumen es la mayor ineficiencia nutricional en los rumiantes.

La formación de amonio en el rumen depende de la solubilidad y degradabilidad de la proteína de la dieta y de la proteína endógena (Huntington y Archibeque 1999). Huntington y Archibeque (1999) afirman que al menos entre la mitad y todo el nitrógeno que ingresa al rumen se convierte en amonio. Parker et al (1985; citados por Huntington y Archibeque 1999) trabajando con ovejas estimaron que las pérdidas irreversibles del nitrógeno amoniacal del rumen equivalen a 3.829 + 0.507*NC, donde NC es el nitrógeno consumido. Esta regresión indica que cerca del 50% del NC se transforma en amonio y se pierde para el animal.

También sido señalado que los rumiantes pueden absorber más nitrógeno como amonio que como aminoácidos (Huntington 1986) particularmente cuando se trata de dietas basadas en forrajes con altos contenidos de proteínas (Vaughan et al 2002; Annison y Bryden 1999). Reynolds (1992) estimó que la absorción neta de amonio hacia el sistema porta puede representar hasta 49% del N consumido mientras que Huntington y Archibeque (1999) señalan que la absorción del amonio puede representar hasta el 73% del N consumido. Es muy probable, entonces, que bajo las condiciones de alimentación que predominan en los hatos de lechería especializada en Antioquia, el porcentaje del nitrógeno consumido que es absorbido como amonio, supere el 50%.

Flujo de proteína microbiana y PNDR hacia el duodeno

El que la proteína microbiana sintetizada en el rumen pueda hacer aportes de aminoácidos en el intestino, depende de que esta fluya desde el rumen hacia el duodeno. Sin embargo, debido al reciclaje de la masa microbiana en el rumen, particularmente de protozoarios (Leng et al 1986), no toda la proteína sintetizada en el rumen fluye hacia el duodeno. En el sistema de carbohidratos y proteína neta de Cornell se asume que en ausencia de protozoos el rendimiento de la masa microbiana seca es de 0.5 gramos por cada gramo de carbohidratos fermentados y que en presencia de protozoos este rendimiento cae a 0.4 gramos (Russell et al 1992).

Aunque existen diversos métodos para estimar el flujo de proteína microbiana hacia el duodeno (Carro 1999), la medición de la excreción urinaria de derivados puricos (DP) presenta varias ventajas frente o otros métodos, la más importante de la cual es que se trata de una técnica no invasiva y de fácil ejecución ya que solamente requiere la recolección total de orina y la cuantificación de los DP en esta. También se ha señalado que medición de creatinina en pequeñas muestras de orina a lo largo del día es suficiente para estimar la producción total de orina con lo que la técnica se facilita mucho más (Valadares et al 1999).

Utilizando la técnica de los DP en la orina y haciendo la recolección total de orina con arneses, Rueda y Taborda (2003) estimaron el flujo de proteína microbiana hacia el duodeno en vacas Holstein y encontraron que el promedio fue 0.482 kgr/vaca/día, lo cual correspondió al 48.8% del valor estimado utilizando el modelo del NRC (2001) que como se indicó previamente, fue de 986.4 gr/vaca/día. Esta diferencia puede ser debida a que el modelo NRC (2001) estima la síntesis de proteína microbiana basado en los NDT como fuente de energía para la síntesis microbiana. Sin embargo, se ha reconocido que los lípidos, uno de los componentes de los NDT, no hacen aporte al crecimiento microbiano (Van Soest 1994) y que, por el contrario, pueden reducirla (Sauvant y Bas 2001). Por otro lado, la ecuación del NRC (2001) presume que la eficiencia en el uso de la energía para el crecimiento microbiano es constante y se ignora el costo de mantenimiento de la población microbiana en el rumen. Según Russell et al (1992) el costo de mantenimiento en las bacterias celulolíticas asciende a 0.05 gramos de carbohidratos fermentables por cada gramo de bacteria en rumen/h en tanto que para las bacterias amilolíticas, este costo asciende a 0.15 gramos de carbohidratos fermentables por cada gramo de bacteria en rumen/h. Por otro lado, se deben tener en cuenta las limitaciones que representan el aporte asincrónico e insuficiente de CNE para la síntesis de proteína microbiana en el rumen como se discutió previamente.

Mejía y Vargas (2004), utilizando la misma técnica empleada por Rueda y Taborda (2003), encontraron que el flujo de proteína microbiana al duodeno en vacas Holstein lactantes fue de 0.552 kgr/vaca/día cuando trabajaron con los datos de Saldarriaga y Soto (2004) y fue de 0.471 kgr/vaca/día cuando trabajaron con los datos de Betancur y Trujillo (2004). Auque no se pueden descartar los errores asociados a la técnica de los DP en la orina, los trabajos de Rueda y Taborda (2003) y de Mejía y Vargas (2004) sugieren que el flujo de proteína microbiana hacia el duodeno en vacas Holstein lactantes en las condiciones de explotación que predominan en Antioquia, serían más bajas que las estimadas mediante el modelo NRC (2001).

El trabajo de Rueda y Taborda (2003) se realizó simultáneamente con el de Delgado (2002) mientras que Mejía y Vargas (2004) trabajaron simultáneamente con Betancur y Trujillo (2004) y con Saldarriaga y Soto (2004). Esto permite realizar algunas estimaciones sobre la eficiencia con la que se habría sintetizado la proteína microbiana en el rumen a partir de la PDR consumida. Los datos aparecen en la tabla 9.

Los datos de la tabla 9 indican que la eficiencia en el uso de la PDR para la síntesis de proteína microbiana en el rumen es muy baja. El NRC (2001) estima que bajo condiciones en las que exista un suministro adecuado de energía y N al rumen, la eficiencia en el uso de la PDR para la síntesis de proteína microbiana asciende al 85%, una cifra muy superior a la encontrada en los trabajos citados en la tabla 9. Asumiendo que la PDR que no es utilizada en la síntesis de proteína microbiana es transformada hasta amonio, la cantidad de amonio que queda disponible para ser absorbido es bastante alta, lo que confirma las afirmaciones de Leng y Nolan (1984) y de Eschenlauer et al (2002) cuando señalan que la formación de amonio en el rumen es un procesos que genera grandes ineficiencias nutricionales en los rumiantes.

En la tabla 10 se presentan los valores estimados del flujo de aminoácidos hacia el duodeno en los trabajos de Delgado (2002), Betancur y Trujillo (2004) y Saldarriaga y Soto (2004). Estos valores se calcularon asumiendo que la composición de aminoácidos de la PNDR del pasto kikuyo es similar al perfil de aminoácidos de la proteína de este pasto (Tedeschi et al 2001), que el perfil de aminoácidos de la proteína microbiana que fluye al duodeno es similar al perfil publicado por Clark et al (1992) y que el perfil de aminoácidos de la PNDR del suplemento alimenticio es intermedio entre el del pasto kikuyo y el de la proteína microbiana.

Digestibilidad intestinal de las proteínas

Los métodos de evaluación posruminal del valor nutricional de los alimentos pretenden establecer el grado de digestión que sufren las fracciones nutricionales contenidas en la digesta que fluye desde el rumen hacia el tracto posterior (Stern et al 1997). Para adelantar estudios sobre la extensión de la digestión posruminal de las proteínas se ha apelado a técnicas in vitro, in vivo o a técnicas de regresión. Entre las técnicas in vitro la más utilizada es la de los tres pasos (Calsamiglia y Stern 1995) mientras que entre las técnicas in vivo se tienen aquellas en las que se utilizan animales modificados quirúrgicamente (dotados de cánulas duodenales) (Stern et al 1997) o aquellas con animales enteros (Třináctý et al 1999). Con estas dos últimas técnicas se pueden utilizar bolsas móviles. Para este fin también se han utilizado modelos biológicos tales como gallos (Gerber et al 2000) presumiendo que la digestión que se presenta en los residuos de la degradación ruminal en estos animales es equivalente a la que se presentaría en el animal rumiante a nivel posruminal. También ha sido reportado el uso de cerdos como modelos biológicos para el estudio de la digestibilidad posruminal de la proteína de canola (Mustafa et al 2000). En este último trabajo se instalaron cánulas duodenales en tres cerdos a través de las cuales se introdujeron bolsas móviles de nailon con muestras de material no degradado en rumen cuyos resultados fueron comparados con los obtenidos en terneros canulados al duodeno a los que también se les insertaron bolsas móviles de nailon. Los resultados obtenidos por Mustafa et al (2000) sugieren que los cerdos son un buen modelo para adelantar este tipo de estudios.

Basado en esta idea, Monsalve (2004) estimó la digestibilidad intestinal de la proteína del pasto kikuyo cosechado a dos edades y sometido a dos niveles de fertilización nitrogenada utilizando muestras que fueron previamente incubadas en el rumen durante 16 horas. Muestras del residuo de esta incubación se empacaron en bolsas de nailon de 1.5 x 2.5 cm (0.08 gr/bolsa) y luego se introdujeron oralmente a cerdos en levante (60 kg de peso vivo) para ser recogidas posteriormente en las heces y determinar la digestibilidad aparente de la PC. Los resultados (tabla 11) indican que no hubo efecto ni de la fertilización nitrogenada ni de la edad de corte sobre los parámetros evaluados.

La ausencia de efecto de la fertilización nitrogenada sobre el contenido de proteína cruda del pasto Kikuyo ha sido atribuido al nitrógeno remanente en el suelo aún después de cuatro periodos de corte con intervalos de 30 Días (Soto y Valencia 2004). Esto estaría indicando que presumiblemente es innecesaria la fertilización nitrogenada luego de cada pastoreo y que esta, en consecuencia, estaría generando bajas eficiencias en el uso del nitrógeno para la síntesis de proteína en los forrajes y, por la misma razón, se estaría convirtiendo en una fuente de contaminación para el suelo y las aguas de lixiviación (Knowlton,1998)

Por otro lado, la ausencia de efecto de la edad de corte sobre el contenido de proteína cruda es atribuida al habito de crecimiento del pasto Kikuyo, ya que al tratarse de un pasto con crecimiento rizomatoso y estolonífero, y dado que estos últimos crecen a ras de la superficie del suelo, los órganos vegetativos que quedan disponibles para ser consumidos por los animales son básicamente las hojas, las cuales muestran poca variación a lo largo del periodo del crecimiento vegetativo (Soto y Valencia 2004; Zapata 2000)

La ausencia de efecto de la edad y la fertilización nitrogenada sobre la degradación a las 16 horas no es más que el reflejo de la ausencia de efecto de estos factores sobre el contenido de proteína cruda y de los parámetros de cinética ruminal (Soto y Valencia 2004).

El promedio de la digestibilidad intestinal de la PC en los residuos de la degradabilidad ruminal a las 16 horas fue 58.57% sin que se observaran diferencia significativas entre el nivel de fertilización nitrogenada y la edad de corte (p>0.54). Estos resultados eran de esperarse toda vez que tampoco hubo efecto de estos factores sobre el contenido de PC, los parámetros de cinética ruminal de la PC y la degradabilidad ruminal de la PC a las 16 horas (Monsalve 2004), como fue discutido previamente.

La digestiblidad intestinal de la PNDR del pasto kikuyo hallado por Monsalve (2004) se encuentra dentro de los valores establecidos en el sistema nórdico (NKJ-NJF 1985) para forrajes y dentro de los valores publicados por el NRC (2001) para los forrajes utilizados en los Estado Unidos para alimentar ganado lechero. Así, para Cynodon dactylon se asume un valor de 65%, este asciende a 70% para henos de pasto joven y desciende a 60% para henos de pastos maduros con un contenido de FDN superior a 60%.

Los resultados reportados por Monsalve (2004) son de gran importancia en la comprensión de la nutrición nitrogenada en el ganado lechero en Antioquia. Ya se habían señalado con anterioridad las limitaciones que presenta la proteína del pasto kikuyo en cuanto al contenido de aminoácidos esenciales. Si a estas limitaciones se le suma el hecho de que al menos el 44.73% escapa a la degradación ruminal (tabla 4), que la PNDR proveniente del pasto kikuyo representa más del 75% de la PNDR de la dieta (tabla 5) y a que, como fue reportado por Tedeschi et al (2001), el perfil de aminoácidos de la PNDR de los pastos es similar al del material original, se podría esperar que el perfil de aminoácidos de la proteína de la dieta que alcanza el duodeno, sea pobre en aminoácidos esenciales. Si a esta situación se le suman las limitaciones en la síntesis de proteína microbiana en el rumen y, por lo mismo, el limitado flujo de proteína microbiana hacia el duodeno, el panorama no deja de ser desalentador.

En cuanto a la digestibilidad intestinal de la proteína microbiana, el modelo del NRC (2001) asume que esta equivale al 80% de la proteína microbiana verdadera y que esta última corresponde al 80% de la proteína microbiana sintetizada en el rumen. En el Sistema de Carbohidratos y Proteína Neta de Cornell (Russell et al 1992), por otro lado, se asume que el 60% de la proteína microbiana es proteína verdadera asociada al contenido celular y que el 100% de esta es digerida en los intestinos.

En la actualidad no se cuenta con información sobre la digestibilidad intestinal de la PNDR de los suplementos proteicos utilizados en la alimentación de ganado de leche en Antioquia. Los valores reportados por el NRC (2001) indican que esta digestibilidad puede ser muy variable con valores tan bajos como el 50% para la cascarilla de algodón hasta valores del 93% para la torta de soya (NRC 2001). La mayoría de los valores publicados para las materias primas utilizadas convencionalmente en la elaboración de suplementos alimenticios para ganado de leche en Antioquia, sin embargo, podrían oscilan entre el 80 y 90% de digestibilidad intestinal (tabla 12).

La tabla 13 fue calculada asumiendo que la digestibilidad intestinal de la PNDR del pasto kikuyo fue del 58.6%, que la del suplemento alimenticio fue del 85% y que la de la proteína microbiana fue del 80%.

En la tabla 14, por otro lado, se calculó la relación entre la lisina y los demás aminoácido digestibles presentados en la tabla 13. Así mismo, se presenta esta relación para los datos publicados por Doepel et al (2004) con relación a la cantidad máxima de aminoácidos esenciales digestibles que debe consumir una vaca para maximizar la producción de proteínas lácteas.

Como se puede apreciar en la tabla 14, aparentemente la relación que existe entre los demás aminoácidos esenciales digestibles con la lisina digestible en los sistemas de alimentación de ganado de leche en Antioquia pareciera ser correcta excepto en el caso de la metionina y la leucina lo que podría convertirlos en candidatos a ser considerados los aminoácidos limitantes en estos sistemas de producción.

Absorción de aminoácidos y péptidos

La digestión de las proteínas en los rumiantes se realiza en la porción posterior del intestino delgado, concentrándose en la región ileal debido a que solo allí el pH intestinal es lo suficientemente alto como para que actúen las proteasas intestinales. Por la misma razón, la absorción de los productos de la digestión de las proteínas, los aminoácidos y péptidos, se concentra en el último tercio del intestino delgado (Webb 1990; van der Walt 1993).

Los sistemas de transporte para aminoácidos y péptidos son independientes entre sí, aunque existe interacción en los sistemas de transporte de aminoácidos entre si (Webb1990). El transporte de aminoácidos hacia los enterocitos puede ocurrir por difusión simple, difusión facilitada o por transporte activo (dependiente del sodio), dependiendo de la concentración de los aminoácidos en el intestino (Webb1990).

En general, los aminoácidos esenciales se absorben más rápidamente que los no esenciales, destacándose la metionina como el aminoácido de más rápida absorción (Webb1990). Así mismo, se ha establecido que la absorción de péptidos es aún más rápida que la absorción de los aminoácidos esenciales (Webb1990). En general, es posible afirmar que el proceso de absorción de los aminoácidos no es una limitante par explicar la eficiencia en el uso del nitrógeno en rumiantes.

Metabolismo de aminoácidos y péptidos en el intestino

El intestino delgado no solo es responsable de la digestión y absorción de nutrientes si no que, además, juega un papel importante en el catabolismo de la glutamina arterial y los aminoácidos absorbidos (Wu y Morris 1998; Hanigan 2005). Los aminoácidos absorbidos por la mucosa intestinal son utilizados en el intestino para la síntesis de proteínas secretoras, el reemplazo de células epiteliales y como fuente de energía (Lindsay 1993). Tagari y Bergman (1978) trabajando con ovejas, reportaron que solamente entre el 30 y el 80% de los aminoácidos que se absorbieron en el intestino aparecieron en la sangre portal. La producción de proteínas en el tracto grastrointestinal (TGI) puede ser responsable de la utilización de por lo menos el 50% de los aminoácidos absorbidos (Annison y Bryden 1999; Lapierre et al 2000) de tal manera que sólo cerca de la mitad de los aminoácidos aparentemente absorbidos alcanzan el hígado (Lapierre et al 2000). De hecho, la síntesis de proteínas en el TGI representa entre 25 y 30% de la síntesis total de proteínas en el cuerpo (Harris et al 1990: citados por Annison y Bryden 1999). Esta síntesis de proteínas exige, además, un gasto energético importante toda vez que cada aminoácido que se incorpora a la cadena polipéptica gasta 5 ATP (McBride y Kelly 1990). La mayoría de la glutamina y casi todo el glutamato y el aspartato absorbidos son catabolizados en el enterocito constituyéndose en los principales metabolitos energéticos del intestino (Wu y Morris 1998). Seal y Parker (2000) señalan que cerca del 80% de la producción de CO₂ de las vísceras que drenan al sistemas porta (VDP) proviene del catabolismo del glutamato y el aspartato.

El glutamato y el aspartato son los aminoácidos más abundantes en la proteína del pasto kikuyo (figura 2), en la proteína microbiana y en la proteína de muchos recursos utilizados en la alimentación de ganado de leche (Clark et al 1992). Esto hace que el flujo de dichos aminoácidos hacia el duodeno sea el más alto (Korhonen et al 2002) y que, de alguna manera, compense la alta demanda que existe por estos aminoácidos a nivel intestinal (Wu y Morris 1998).

En la mucosa intestinal también se presenta la síntesis de algunos aminoácidos siendo los más importantes prolina, arginina y alanina. La prolina es sintetizada a partir de la arginina, glutamina, glutamato y aspartato absorbidos desde el lumen intestinal y a partir de la glutamina arterial. La arginina, a su vez, es sintetizada a partir de la glutamina y la prolina en la mucosa intestinal. Por su parte, la síntesis de alanina esta muy ligada al catabolismo intestinal del glutamato, la glutamina y el aspartato (Wu y Morris 1998), así como a la detoxificación del amonio intestinal. Dado que la absorción del amonio se da a lo largo del tracto gastrointestinal de los rumiantes, la absorción intestinal puede ser importante llegando a representar entre el 27 y el 51% de la absorción total de amonio hacia el sistema porta (Huntington y Archibeque 1999). Cuando la absorción de amonio en el intestino es alta, la síntesis de alanina es probablemente la vía más significativa que se presenta para detoxificarlo en comparación con su incorporación al ciclo de la urea no obstante que las células del epitelio ruminal y de la mucosa duodenal posean la capacidad de incorporar el amonio a la ornitina para formar citrulina (Oba et al 2004). Estos autores establecieron que la síntesis de urea, tanto en el epitelio ruminal como en la mucosa duodenal, fue mayor cuando las células de estos tejidos fueron incubadas con arginina que con otros substratos intermedios del ciclo de la urea. Así mismo, lograron establecer que la síntesis de urea en el epitelio ruminal fue 26 veces más alta que en la mucosa duodenal. Estos resultados indican una alta actividad de la enzima arginasa en el epitelio ruminal. Pero por otro lado, cuando estos tejidos fueron incubados con aspartato, ornitina y cloruro de amonio, la síntesis de urea fue muy baja indicando que presumiblemente la enzima carbamoil - fosfato sintetasa I (CPS-I) presenta baja actividad en estos tejidos y que existe una capacidad limitada de incorporar el amonio absorbido, tanto en el rumen como en el duodeno, al ciclo de la urea en estos mismos tejidos. Según Oba et al (2004), la alta actividad de la enzima arginasa en el epitelio ruminal posiblemente estaría cumpliendo dos funciones. En primer lugar, estaría asegurando el reciclaje de N al rumen y, por otro lado, la ornitina estaría participando en la síntesis de las poliamidas requeridas para mantener las altas tasas de división y de diferenciación celular. Es poco probable que la arginasa participe en un proceso inmediato de reciclaje de N al rumen ya que, como se señaló previamente, la incorporación del amonio al ciclo de la urea en estos tejidos es muy limitado y, por lo tanto, la arginina que se utiliza para la síntesis de la urea no proviene del ciclo de la urea en estos tejidos si no que estaría ingresando vía sanguínea. También resulta poco probable que la segunda función atribuida a la alta actividad de la arginasa sea relevante en estos tejidos ya que, al igual que el rumen, la mucosa duodenal también presenta altas tasas de división celular pero, sin embargo, la actividad de la arginasa es baja. Es más probable que se trate del mecanismo que permite el reciclaje del N hacia el rumen mediado tanto por la arginina como por la glutamina sintetizadas en el hígado. Cabe recordar que la arginina del epitelio intestinal también se origina a partir de la glutamina (Wu y Morris 1998) de tal manera que la glutamina sintetizada en el hígado como un mecanismo alterno de detoxificación del amonio (Haussinger 1983), sea utilizada en el epitelio ruminal para formar arginina y esta, posteriormente, sea catabolizada en urea y ornitina. Así, bajo condiciones de alimentación en las que la formación de amonio en rumen es baja, la cantidad de amonio que ingresa al hígado proveniente del sistema porta también es baja y mayor cantidad de arginina podrá desligarse del ciclo de la urea en el hígado y podrá utilizarse en el epitelio ruminal para sintetizar la urea necesaria en el rumen. Por el contrario, cuando la cantidad de amonio producido en el rumen es alta y, así mismo, es alta la cantidad de amonio que ingresa al hígado, menor será la cantidad de arginina que podrá desprenderse del ciclo de la urea dada la alta demanda de ornitina es este tejido. De esta manera, menor será la cantidad de arginina que quedará disponible para ser utilizada en el epitelio ruminal para formar urea. Es probable, sin embargo, que la ornitina formada en este proceso sea reciclada hacia el hígado. Esto implicaría la existencia de un ciclo de la urea compartimentalizado entre el hígado y el epitelio ruminal. Esta es, de todas maneras, una hipótesis que requiere ser probada pero que podría ser posible ya que ha sido reportado que el metabolismo de la arginina esta altamente compartimentalizado en diferentes órganos debido a que las enzimas que participan en la síntesis y catabolismo de este aminoácido se encuentran distribuidas en diversos órganos (Luiking et al 2004 ; Wu y Morris 1998). Es así como se ha establecido la existencia de una compartimentalización del ciclo de la urea entre el hígado y el riñón en el que el hígado remueve arginina y libera citrulina y ornitina mientras que en el riñón sucede lo contrario (Bergman y Heitmann 1978).

Recapitulando, se hace necesario señalar que el intenso metabolismo que sufren los aminoácidos en la mucosa intestinal, particularmente los no esenciales, se convierte en un importante modulador de la cantidad de aminoácidos absorbidos que finalmente aparecen en la circulación portal. Esto significa que el perfil de aminoácidos de la dieta difiere marcadamente del que se presenta en la sangre portal y debido a las implicaciones que esto tiene en el metabolismo de los tejidos extraintestinales, se hace necesario prestar más atención a dichos procesos metabólicos y a la manera como estos afectan la eficiencia en el uno del nitrógeno en los animales domésticos, en general, y en los rumiantes, en particular.

Metabolismo del nitrógeno en el hígado

El hígado juega un papel central en el metabolismo del nitrógeno modulando la disponibilidad de aminoácidos para los tejidos extrahepáticos (Reynolds 1992). Los aspectos más críticos del metabolismo del nitrógeno que sucede en el hígado incluyen la deaminación y transaminación de aminoácidos seguido por la utilización de los cetoácidos en cetogénesis y gluconeogénesis; la síntesis de urea; la síntesis de aminoácidos escenciales, y la síntesis de la mayoría de las proteínas plasmáticas.

De todos ellos, el ciclo de la urea juega un papel central por estar directamente relacionado con los demás procesos metabólicos, incluida la disponibilidad de aminoácidos para la síntesis de proteínas plasmáticas (Correa y Cuellar 2004).

El hígado, no obstante representar cerca del 5% de la masa corporal consume entre el 21 y 25% del gasto energético del cuerpo (Lindsay 1993). Sin embargo, ha sido establecido que la tasa de uso de energía por el hígado se incrementa con el aumento en la producción de leche, asociado esto, principalmente, con la modificación de nutrientes disponibles para formar aquellos que no se encuentran disponibles para la síntesis de la leche (Freetly y Ferrell 1999). Freetly y Ferrell (1999) señalan que el incremento en el consumo de oxígeno hepático a medida que se incrementa la producción de leche, es debido probablemente al incremento en gluconeogénesis y ureagénesis. La ureagénesis puede consumir entre el 13 y el 19% de todo el oxigeno consumido por el hígado (Huntington y Archibuque 1999).

Annison y Bryden (1999) aseguran que en vacas lactantes de alta producción que pastorean pasturas frescas con alto contenido de PDR y NNP, a menudo presentan una tasa muy alta de transformación del amonio ruminal en urea. Este sería el caso de los sistemas de producción de leche en Antioquia basados en pasto kikuyo.

El amonio es un compuesto neurotóxico observándose un marcado daño cerebral en aquellos casos en los que los procesos de eliminación fallan (King 2002). El hígado remueve y detoxifica el amonio absorbido desde el tracto digestivo, transformándolo principalmente en urea la cual posteriormente es reciclada por saliva o pared ruminal, o eliminada por orina y leche (Annison y Bryden 1999).

La formación de carbamoil fosfato (CbP) a partir de amonio y bicarbonato es el primer paso en la síntesis de la urea (Katz 1992; Waterlow 1999). Esta reacción, sin embargo, es de baja afinidad por el amonio por lo que el amonio que deja la zona intermedia del hígado, que es donde se concentran las enzimas que participan en el ciclo de la urea, debe ser incorporado a otra reacción (Katz 1992): la formación de glutamato .

La enzima glutamato deshidrogenasa cataliza la formación del glutamato a partir de amonio y a - cetoglutarato (King 2000). Esta ruta es importante en animales no-rumiantes, ya que el exceso de amonio puede ser retenido como glutamato o glutamina cuando es excedida la capacidad de la reacción catalizada por la CPS-I (Haussinger 1983). Es de esperarse que esta reacción también se presente en los rumiantes, particularmente cuando consumen dietas que generen altas cantidades de amonio en rumen como es el caso de los sistemas de alimentación en las lecherías especializadas en Antioquia. En estas condiciones una parte del amonio absorbido ingresa al ciclo de la urea al formar CbP mientras que otra porción, dependiendo de la cantidad de amonio absorbida, será retenida por la ruta del glutamato. Este aminoácido, a su vez, se puede condensar con otra molécula de amonio para formar glutamina, reacción que es catalizada por la enzima glutamina sintetasa (King 2000). Esta reacción, al contrario de la catalizada por la CPS-I, es de baja capacidad pero de alta afinidad (Julliard et al 1971).

La vía de la glutamina es importante por varias razones (Correa y Cuellar 2004). Primero, produce el aminoácido glutamina, uno de los 20 principales aminoácidos. En segundo lugar, en los mamíferos la glutamina es el principal aminoácido establecido en el sistema circulatorio. Su papel es transportar amonio desde varios tejidos, principalmente tejidos periféricos, hacia el riñón, donde es hidrolizada por la enzima glutaminasa para regenerar glutamato liberando el ión amonio. Este último es finalmente excretado en orina (King 2000). De esta forma, glutamina permite excretar rápidamente, sin necesidad de pasar a través del ciclo de la urea, el ión amonio. Este proceso, sin embargo, puede representar un costo para el organismo en cuanto a la disponibilidad de precursores para gluconeogénesis dado que para la formación de glutamato se gasta a - cetoglutarato. Esta es precisamente la reacción que hace del ión amonio un compuesto tóxico en el cerebro (King 2000).

Los resultados reportados por Montoya et al (2004) parecen reforzar esta hipótesis. Estos autores trabajaron con vacas Holstein lactantes de mediana producción (ver tabla 8) alimentadas con pasto kikuyo con un contenido de 26% de PC y encontraron que la relación entre la concentración de glucosa y nitrógeno ureico en la sangre fue negativa indicando presumiblemente una saturación del ciclo de la urea con la consecuente utilización de a - cetoglutarato para la síntesis de glutamato en detrimento de la producción de glucosa.

Esta también podría ser la razón por la que in vitro, la adición de NH₄Cl a hepatocitos de corderos reduce la utilización de propionato y alanina en gluconeogénesis (Overton et al 1998). Bajo esta hipótesis, se podría esperar una marcada reducción en gluconeogénesis en vacas periparturientas que consumen forrajes jóvenes con alto contenido en proteína degradable en rumen y movilizan cantidades importantes de proteínas lábiles con el consecuente incremento de amonio hacía el hígado (Komaragiri y Erdman 1997).

Hacia el glutamato convergen la mayoría de las transaminasas. Esto representa una forma de simplificar en un solo aminoácido la recolección del grupo amino proveniente de diversos aminoácidos. Este aminoácido es degradado a a - cetoglutarato y amonio, reacción que es catalizada, así mismo, por la enzima glutamato deshidrogenasa (King 2000). En esta reacción inversa, el NAD+ participa como cofactor para dar origen al NADH+H, molécula que genera tres ATP durante la fosforilación oxidativa.

Otra implicación metabólica de suma importancia para la economía del nitrógeno en rumiantes tiene que ver con la necesidad de un segundo átomo de nitrógeno proveniente del aspartato que puede exceder la disponibilidad de aspartato y estimular su síntesis por transaminación desde otros aminoácidos (Annison y Bryden 1999; Moorby and Theobald 1999; Mutsvangwa 1999) con el consecuente desgaste de aminoácidos que bien podrían quedar disponibles para ser utilizados por tejidos extrahepáticos y síntesis de proteínas lácteas (Moorby and Theobald 1999, Reynolds et al 1994). La formación del aspartato se da por la transaminación entre el glutamato y el oxaloacetato para formar aspartato y a - cetoglutarato (Mutsvangwa et al 1999). Reynolds (1992) ha propuesto que el gasto de aminoácidos para regenerar el aspartato que participa en el ciclo de la urea, podría incrementar los requerimientos de aminoácidos por el animal y, en consecuencia, reducir la eficiencia en la utilización de la proteína. Mutsvangwa et al (1999), evaluaron el efecto de la adición de cloruro de amonio a hepatocitos de ovejas aislados sobre el flujo de aminoácidos hacia los dos átomos de nitrógeno de la urea, con lo que pudieron establecer el uso preferencial del amonio para proveer estos dos átomos a través de la vía del aspartato y la del carbamoil fosfato. Los autores encontraron, además, evidencia que demuestra que la detoxificación del amonio hacia urea estimula el catabolismo de la metionina lo que implicaría que en rumiantes alimentados con dietas que contengan altos contenidos de proteína degradable en rumen, como es el caso de las vacas lactantes en los sistemas especializados basados en pasto kikuyo (Pennisetum clandestinum), se podrían presentar limitaciones para cubrir los requerimientos por este aminoácido. Esto implicaría, así mismo, que los requerimientos por este aminoácido podrían ser comparativamente más altos, bajo estas condiciones de alimentación, que en aquellas basadas en ensilaje de maíz y alfalfa como las que predominan en Norteamérica. Si a esto se le suma el hecho de que el aporte de este aminoácido en las condiciones de alimentación que predominan en Antioquia para ganado lechero es bajo con relación al aporte de lisina (ver tabla 13), refuerza aún más la idea de que se trata del aminoácido más limitante para la producción de proteínas lácteas en estas condiciones de alimentación.

La síntesis de proteínas de exportación en el hígado (apoproteínas, albúminas, fibrinógeno, etc) que puede alcanzar 120 g/día en una vaca en producción, presentan altas cantidades de histidina y fenilalanina afectando la disponibilidad de estos aminoácidos para los tejidos extrahepáticos (Lapierre y Lobley 2001).

En general, se reconoce que en el hígado se remueve una mayor cantidad de aminoácidos no esenciales dada su participación en gluconeogénesis (Lapierre et al 2000; Reynolds et al 1994). Galvis et al (2003) realizaron biopsias hepáticas a un grupo de 10 vacas Holstein de un hato lechero del municipio de San Pedro de los Milagros (Antioquia) y encontraron una relación positiva entre la actividad de la enzima fosfoenolpiruvato carboxikinasa y la concentración plasmática de nitrógeno ureico sugiriendo que los aminoácidos gluconeogénicos se constituyeron en una fuente importante para la síntesis de glucosa. Alanina y glicina son los aminoácidos removidos en mayor cantidad por el hígado seguidos por la glutamina, mientras que los aminoácidos de cadena ramificada y la leucina son removidos en baja cantidad (Reynolds et al 1994). De esta manera, luego de su paso por el hígado es mayor la cantidad de aminoácidos de cadena ramifica, lisina y glutamato disponibles para los tejidos periféricos, incluida la glándula mamaria, que los demás aminoácidos (Reynolds et al 1994). Reynolds et al (1988) estimaron que el hígado puede remover en promedio hasta el 42% de los aminoácidos en vacas lactantes produciendo 32 litros de leche. Blouin et al (2002) encontraron que la utilización neta de los aminoácidos absorbidos en la vena porta a su paso por el hígado varía desde valores tan bajos como 4% para la Lisina hasta el 83% para la Glicina sin que los resultados se vieran afectados por el nivel de suministro de proteína metabolizable, excepto en el caso de la glicina (p<0.07) cuya extracción fue muy alta (83%) cuando el suministro de proteína metabolizable fue alta, pero presentando muy baja extracción (11%) cuando el suministro de proteína metabolizable fue baja.

El hígado parece jugar un papel muy importante en el mantenimiento del perfil de aminoácidos en la sangre periférica removiendo los aminoácidos que se encuentren en exceso (Lapierre et al 2000).

Resumiendo, al igual que la mucosa intestinal, el hígado remueve gran cantidad de aminoácidos no esenciales siendo un importante modulador del perfil de aminoácidos absorbidos en el intestino determinando, en última instancia, la cantidad de aminoácidos disponibles para los tejidos extrahepáticos incluida la glándula mamaria. La extracción de aminoácidos por el hígado varia entre el 25 y 50% de los aminoácidos que ingresan variando ampliamente entre cada aminoácido.

Metabolismo del nitrógeno en tejidos extrahepáticos

En términos cuantitativos, los tejidos periféricos (músculos, huesos, tejidos adiposo, piel) juegan un papel de menor importancia en el metabolismo del nitrógeno que el que representan la mucosa intestinal y el hígado. Así, aunque la canal (músculos, huesos y tejido adiposo) y la piel en su conjunto representan entre el 80 y 90% del peso corporal utilizan menos del 50% del consumo total de energía en un rumiante en descanso (Harris y Lobley 1991). En términos generales, la tasa fraccional de síntesis de proteínas en mucho mayor en el intestino de ovejas (50%/d) (Lobley et al 1994) que en los músculos (3 - 4 %/d) (Lobley 1993). Los tejidos periféricos, sin embargo, son el principal sitio de acumulación de nutrientes y, por lo mismo, de movilización de estos. Komaragiri y Erdman (1997) encontraron que la movilización de proteínas corporales en vacas Holstein recién paridas fue de 21 kg hasta la quinta semana post parto lo que significa una movilización de 0.6 kg/día. Dicha movilización de proteínas, particularmente aquellas provenientes del tejido muscular, apoya al direccionamiento de nutrientes hacia la glándula mamaria al inicio de la lactancia (Bell et al 2000; Bauman 2000). De manera similar, bajo condiciones de subalimentación la movilización de proteínas de almacenamiento menos importantes para la conservación de la vida (músculo) pueden ser utilizadas para conservar la estructura y función de órganos vitales (hígado, riñones, sistema cardiovascular) (Lobley 2003). Los mecanismos que subyacen al direccionamiento de nutrientes hacia la glándula mamaria durante la lactancia ha sido discutido durante más de dos décadas (Bauman y Currie 1980; Bell 1995; Grummer 1995; Drackley 1999; Bauman 2000).

Reynolds et al (1994) reportaron que, en promedio, el 36% de los aminoácidos que escaparon a la extracción hepática fueron recuperados en la proteína de la leche. En el caso de los aminoácidos esenciales, este valor es más alto aunque existen marcadas diferencias entre ellos. Los datos reportados por Lobley y Lapierre (2001) da luces al respecto (tabla 15).

En la tabla 15 se aprecia que la eficiencia con la que los aminoácidos disponibles a nivel post hepáticos son incorporados en la leche (Eficiencia L : H) varía entre 0.59 para la leucina y alrededor de 1.0 para metionina y fenilalanina. La eficiencia de la histidina es también alta (0.85) y este aminoácido junto con tirosina, metionina y fenilalanina que son liberados a nivel post hepático, son utilizados para la síntesis de proteínas lácteas con una eficiencia cercana al 100%. Por tal razón, la disminución en la disponibilidad post hepática de cualquiera de estos aminoácidos, es decir, un incremento en la extracción hepática, afectará la síntesis de proteínas lácteas (Lapierre et al 2000). La menor eficiencia observada en otros aminoácidos estaría indicando que estos son utilizados en el metabolismo de tejidos extrahepáticos, incluido el de la glándula mamaria (Bequette et al 1997).

Metabolismo del nitrógeno en la glándula mamaria

Aunque los procesos metabólicos más importantes de la glándula mamaria involucran la síntesis y excreción de los componentes de la leche, estos dependen del buen funcionamiento de los tejidos mamarios. Los tejidos de la glándula mamaria están conformados por células secretoras y no secretoras las cuales sufren procesos de crecimiento, diferenciación y apoptósis a lo largo de la lactancia y el periodo seco (Capuco et al 1997). Irónicamente, a pesar de la importancia que representa la glándula mamaria en la industria lechera mundial, se conoce poco acerca de sus procesos fisiológicos durante el periodo seco y la lactancia. Es muy limitada la información que se tiene acerca de la extensión en la involución, crecimiento y diferenciación que ocurre en la glándula mamaria de los bovinos durante estos periodos (Capuco et al 1997; NRC 2001). Al igual que el crecimiento del útero grávido, el de la glándula mamaria se incrementa dramáticamente durante las últimas semanas de la gestación (Capuco et al 1997) existiendo, además, una fuerte interacción entre el desarrollo del útero grávido y el de la glándula mamaria mediado por el láctogeno placentario, los estrógenos y la progesterona (Bauman y Currie 1980). No existen, sin embargo, datos suficientes que permitan establecer el uso de nutrientes para el desarrollo de la glándula mamaria ni la forma en que se resuelve la distribución de los nutrientes entre el desarrollo de la glándula mamaria y el del útero grávido (NRC 2001).

La glándula mamaria recibe el perfil de aminoácidos que resulta de los procesos acumulados desde el consumo mismo de proteína hasta el metabolismo de los aminoácidos en tejidos extrahepáticos, como fue reseñado previamente. El porcentaje de extracción de aminoácidos por la glándula mamaria es muy variable tanto entre aminoácidos como dentro de un mismo aminoácido dependiendo de la dieta recibida. Así, por ejemplo, para la serina se han reportado valores tan bajos como 0,7% en una dieta basada en ensilaje de pastos y cebada (Korhonen et al 2002) hasta valores tan altos como 39.9% en una dieta basada en alfalfa y maíz hojuelado al vapor (Tagari et al 2004). Otro aminoácido que muestra alta variabilidad es la asparagina mientras que el glutamato, la alanina y el aspartato muestran baja variabilidad (tabla 16).

Bequette et al (1997) trabajando con cabras lactantes, también reportaron una alta variabilidad en la partición de los aminoácidos plasmáticos hacia la glándula mamaria. En su trabajo encontraron que menos del 20% de la histidina, serina y fenilalanina plasmática fueron dirigidas hacia la glándula mamaria; entre el 20 y el 30% de arginina, treonina, tirosina y leucina fueron particionadas hacia la glándula mamaria; y entre el 30 y 40% prolina, isoleucina, lisina y valina fueron dirigidos hacia la glándula mamaria. Así, en promedio, el 25% de los aminoácidos plasmáticos se dirigieron hacia la glándula mamaria. Dentro de la glándula mamaria, la partición de los aminoácidos entre la síntesis de proteínas lácteas y otras funciones metabólicas también varía entre aminoácidos. Arginina, prolina, fenilalanina, tirosina, histidina y treonina presentan una menor actividad metabólica en la glándula mamaría siendo utilizados principalmente en la síntesis de proteínas lácteas. Al contrario, valina, isoleucina y leucina, tienen una mayor participación en procesos metabólicos de la glándula mamaria diferentes a la síntesis de proteínas lácteas (Bequette et al 1997).

Existen muchas dificultades para interpretar y comparar estos datos debido en primer lugar a que los aminoácidos no solo son transportados en el plasma sanguíneo, si no, además en los glóbulos rojos existiendo una pobre correlación entre la extracción de aminoácidos desde el plasma sanguíneo con la extracción de aminoácidos desde la sangre entera (Hanigan et al 1991). Así, los resultados del trabajo de Korhonen et al (2002) y de Tagari et al (2004) presentados en la tabla 16, fueron obtenidos con base en el análisis de aminoácidos en plasma sanguíneo. Así mismo, los resultados del trabajo de Bequette et al (1997) reseñados previamente, también fueron a partir del análisis de aminoácidos en plasma sanguíneo.

En segundo lugar, ha sido demostrado que el aporte de aminoácidos ligados a los péptidos que son extraídos por la glándula mamaria, es cuantitativamente muy importante. Tagari et al, (2004) reportaron una significativa correlación entre la extracción por la glándula mamaria de la mayoría de los aminoácidos y su incorporación en proteínas de la leche. Solamente glutamina, glicina y serina estuvieron pobremente correlacionados. Sin embargo, cuando se incluyeron los aminoácidos ligados a los péptidos extraídos por la glándula mamaria, las correlaciones se modificaron. Así, se mejoraron las correlaciones para arginina, histidina, lisina y metionina pero disminuyeron para isoleucina, leucina, fenilalanina, triptófano y valina.

Los resultados de Tagari et al (2004) presentados en la tabla 16 corresponden únicamente para aminoácidos libres así como los resultados de los trabajos de Korhonen et al (2002) y de Bequette et al (1997).

Finalmente, cabe resaltar los resultados del trabajo de Black et al (1990) quienes estimaron la tasa y la extensión de la oxidación de 20 aminoácidos en vacas lactantes. Estos autores encontraron que solamente cuatro aminoácidos - glutamato, aspartato, alanina y glutamina - fueron oxidados intensamente (ver figura 5) y que la extensión en su oxidación es comparable a la obtenida en ácidos grasos volátiles.

La oxidación observada en los demás aminoácidos fue significativamente más baja, indicando, presumiblemente, una mayor disponibilidad en el tiempo, para ser utilizados en la síntesis de proteínas. Histidina y treonina fueron los aminoácidos que mostraron la menor extensión en su oxidación hasta CO₂.

En cuanto a la tasa de oxidación, Black et al (1990) reportaron que la aparición de CO₂ luego de la infusión de los aminoácidos marcados, fue más rápida en alanina y aspartato (menos de un minuto) que en arginina (casi tres minutos), representando el nivel de complejidad de las reacciones catabólicas que se presenta en cada caso.

Los resultados de Black et al (1990) indican que los aminoácidos esenciales presentan una vida media más prolongada en el animal que los aminoácidos no esenciales lo que, desde el punto de vista de la economía del N, es de suma importancia para el rumiante. Muy probablemente tanto la extensión como la tasa de oxidación de los aminoácidos puedan ser utilizadas como estimadores del requerimiento por parte del animal. Sin embargo, es necesario señalar que los resultados del trabajo de Black et al (1990) presentan un sesgo muy importante para ser utilizados como estimadores de la oxidación de estos aminoácidos en el animal ya que estos fueron introducidos en la vena porta y excepto en el caso de la glutamina (Wu y Morris 1998), los demás aminoácidos que viajan en la sangre presentan muy baja extracción por el epitelio intestinal y, como fue señalado previamente, entre el 30 y el 80% de los aminoácidos absorbidos en el intestino son metabolizados allí mismo (Tagari y Bergman 1978) y cerca del 80% de la producción de CO₂ de las vísceras que drenan al sistemas porta (VDP) proviene del catabolismo del glutamato y el aspartato (Seal y Parker 2000).

Conclusiones

• La condiciones nutricionales y alimenticias que predominan en los sistemas de producción de leche bovina en las zonas frías del departamento de Antioquia (Colombia), determinan en buena medida la baja concentración de proteína en la leche.

• Se destaca la baja síntesis de proteína microbiana en el rumen como consecuencia del alto contenido de PDR tanto en el pasto kikuyo como en los suplementos alimenticios, así como la baja concentración de CNE en el pasto kikuyo.

• La asincronía en el suministro de los suplementos alimenticios se constituye en otra limitante alimenticia que reduce la utilización de la PDR para la síntesis de proteína microbial en el rumen, generándose, en consecuencia, altas cantidades de amonio que es absorbido y transformado en urea en el hígado.

• El alto porcentaje de PDR tanto en el pasto kikuyo como en los suplementos alimenticios, conjuntamente con la baja síntesis de proteína microbiona en el rumen, implican un menor flujo de aminoácidos al duodeno.

• La utilización de aminoácidos en el metabolismo intestinal y en la formación de la urea en el hígado, limitan la disponibilidad de los mismos en la glándula mamaria para la síntesis de proteínas lácteas.

Bibliografía

Agudelo M y Puerta H 2004 Efecto del esquema de suministro de un suplemento alimenticio comercial sobre algunos parámetros metabólicos y productivos en vacas lactantes. Trabajo de grado de Zootecnia, Departamento de Producción Animal, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Medellín. 33 p.

Alcaráz C, Alviar D, Correa H. 2001 Eficiencia en el uso de nitrógeno en vacas lactantes en un hato lechero del oriente antioqueño; Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias. (14) Suplemento 34.

Aldana C 1990 Productividad y rentabilidad en sistemas de producción bovina en Colombia; Coyuntura Agropecuaria. (7) 81 - 103.

Annison EF, Bryden WL 1999 Perspectives on ruminant nutrition and metabolism. II. Metabolism in ruminant tissues; Nutritional Research Reviews. (12) 147 - 177. http://docstore.ingenta.com/cgi-bin/ds_deliver/1/u/d/ISIS/25341838.1/cabi/nrr/1999/00000012/00000001/art00007/4066FB87F136856F1137523545ABB0882E4FB1D07B.pdf?link=http://www.ingentaconnect.com/error/delivery&format=pdf

Bauman D E 2000 Regulation of nutrient partitioning during lactation: homeostasis and homehoresis revisited; In: Ruminant physiology: digestion, metabolism, growth and reproduction. (editor P B Cronje). CAB international. 311 - 328.

Bauman D E and Currie B 1980 Partitioning of nutrients pregnancy and lactation: a review of mechanisms involving homeostasis and homeorresis; Journal of Dairy Science. (63) 1514 - 1529.

Bell AW 1995 Regulation of organic nutrient metabolism during transition from late pregnancy to early lactation; Journal of Animal Science. (73) 2804 - 2819. http://jas.fass.org/cgi/reprint/73/9/2804

Bell A W, Burhans W S and Overton T R 2000 Protein nutrition in late pregnancy, maternal protein reserves and lactation performance in dairy cows; The Proceedings of the Nutrition Society. (59) 119 - 126. http://docstore.ingenta.com/cgi-bin/ds_deliver/1/u/d/ISIS/25342340.1/cabi/pns/2000/00000059/00000001/art00014/303EF8B771EFB2A2113752433694F61AA615AC747A.pdf?link=http://www.ingentaconnect.com/error/delivery&format=pdf

Bequette B J, Backwell F R C, Calder A G, Metcalf J A, Beever D E, Macrae J C and Lobley G E 1997 Application of a U-13C-labeled amino acid tracer in lactating dairy goats for simultaneous measurements of the flux of amino acids in plasma and the partition of amino acids to the mammary gland; Journal of Dairy Science. (80) 2842 -2853. http://jds.fass.org/cgi/reprint/80/11/2842

Bergman E N and RN Heitmann 1978 Metabolism of amino acids by the gut, liver, kidneys, and peripheral tissues; Federation Proceedings. (37) 1228 - 1232.

Bernal L C y Montoya S 2004 Balance energético y proteico en vacas al inicio de la lactancia y su relación con el estado metabólico. Trabajo de grado de Zootecnia, Departamento de Producción Animal, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Medellín. 75 p.

Betancur J F y Trujillo L G 2004 Balance de nitrógeno en vacas lecheras de alta producción alimentadas con pasto kikuyo (Pennisetum clandestinum) y dos niveles de suplementación de proteína no degradable en el rumen. Trabajo de grado de Zootecnia, Departamento de Producción Animal, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Medellín. 30 p.

Black A L, Anand R S, Bruss M L, Brown C A, Nakagiri J A 1990 Partitioning of amino acids in lactating cows: oxidation to carbon dioxide; Journal of Nutrition. (120): 700-10

Blouin J P J, Bernier F, Reynolds C K, Lobley G E, Dubreuil P and Lapierre H 2002 Effect of supply of metabolizable protein on splanchnic fluxes of nutrients and hormones in lactating dairy cows; Journal of Dairy Science. (85)2618 - 2630. http://www.dairy-science.org/cgi/reprint/85/10/2618

Butler W R 1998 Effect of protein nutrition on ovarian and uterine physiology; Journal of Dairy Science. (81) 2533 - 2539. http://jds.fass.org/cgi/reprint/81/9/2533

Calsamiglia S and Stern M D 1995 A three-step in vitro procedure for estimating intestinal digestion of protein in ruminants; Journal of Animal Science. (73)1459-1465. http://jas.fass.org/cgi/reprint/73/5/1459

Capuco A V, Akers R M and Smith J J 1997 Mammary growth in Holstein cows during the dry period: quantification of nucleic acids and histology; Journal of Dairy Science. (80) 47 - 487. http://jds.fass.org/cgi/reprint/80/3/477

Carro M D, López S, Valdés C y Ranilla M J 1999 Efecto de la suplementación nitrogenada sobre la fermentación ruminal in vitro de forrajes deficientes en nitrógeno; Archivos de Zootecnia. (48) 295-306. http://www.uco.es/organiza/servicios/publica/az/php/img/web/02_03_24_05carro.pdf

Carulla J 1999  Efectos de la fertilización nitrogenada sobre la proteína del forraje; En: Memorias Simposio internacional sobre la proteína de la leche.  Colanta.  Medellín. 4 y 5 de Noviembre.

Castro G 2004 Precios de COLANTA benefician a ganaderos, a la ganadería y a Colombia. Revista Ecolanta. Número 210 6 - 7

Clark H, Klusmeyer T H and Cameron M R 1992 Microbial protein synthesis and flows of nitrogen fractions to the duodenum of dairy cows; Journal of Dairy Science. (75)2304. http://jds.fass.org/cgi/reprint/75/8/2304

Consejo Regional Lácteo 2001 Acuerdo regional de Competitividad de la Cadena Láctea en Antioquia. 75 pg. http://www.agrocadenas.gov.co/documentos/documentos_iica/ No%2020.pdf

Correa H J 2002 El metabolismo del nitrógeno y su relación con las alteraciones reproductivas en vacas de alta producción; En: II Curso de Actualización en Reproducción Animal, Grupo de Investigación en Biotecnología Aplicada, Politécnico Colombiano Jaime Isaza Cadavid, Medellín, 3 y 4 de octubre.

Correa H J y Cuellar A 2004 Aspectos claves del ciclo de la urea con relación al metabolismo energético y proteico en vacas lactantes. Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias. Vol. 17 29 - 38. http://kogi.udea.edu.co/revista/17/17-1-4.pdf

Correa L y Marín M 2002 Balance energético y proteico en vacas peri parturientas y la relación con su estado metabólico; Trabajo de grado de Zootecnia, Departamento de Producción Animal, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Medellín. 50p.

Delgado G F 2002 Estudio comparativo del balance de nitrógeno en vacas lactantes de dos grupos genéticos; Trabajo de grado de Zootecnia, Departamento de Producción Animal, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Medellín. 67 p.

Dijkstra J, France J and Davies D 1998 Different mathematical approaches to estimating microbial protein supply in ruminants; Journal of Dairy Science. (81) 3370 - 3384. http://jds.fass.org/cgi/reprint/81/12/3370

Doepel L, Pacheco D, Kennelly J J, Hanigan M D, López I F and Lapierre H 2004 Milk synthesis as a function of amino acid supply. Journal of Dairy Science. Vol. 87 1279 - 1297. http://www.dairy-science.org/cgi/reprint/87/5/1279

Drackley J K 1999 Biology of dairy cows during the transition period : the final frontier?; Jourbal of Dairy Science. (82)2259-2273. http://jds.fass.org/cgi/reprint/82/11/2259

Echeverry J y Parra J E 2001 Efecto de la suplementación con varios niveles de una fuente de metionina protegina (MEPRON 85), sobre la producción de leche y el porcentaje de proteína láctea; Informe de Pasantía de Zootecnia, Departamento de Producción Animal, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Medellín. 14 p.

Eschenlauer S C P, McKain N, Walker N D, McEwan N R, Newbold C J and Wallace R J 2002 Ammonia production by ruminal microorganisms and enumeration, isolation, and characterization of bacteria capable of growth on peptides and amino acids from the sheep rumen; Applied and Environmental Microbiology. (68) 4925-4931. http://aem.asm.org/cgi/reprint/68/10/4925

Freetly H and Ferrel CL 1999 Relationship of portal drained viscera and liver net flux of glucose, lactate, volatile fatty acids, and nitrogen metabolites to milk production in the ewe; Journal of Dairy Science. (82) 597 - 604. http://jds.fass.org/cgi/reprint/82/3/597

Gaitán S y Pabón J D 2003 Aplicación del modelo NRC 2001 en la caracterización energética y proteica de los pastos kikuyo (Pennisetum clandestinum, hochst), ryegras (Lolium perenne) y falsa poa (Holcus lanatus) en un hato lechero del oriente antioqueño; Trabajo de grado de Zootecnia, Departamento de Producción Animal, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Medellín. 55 p.

Galvis R D, Correa H J, Ramírez N F y Soler W 2003 Influencia de las alteraciones metabólicas sobre la actividad PEPCK, la generación de IGF-1 plasmático y la reactivación ovárica en vacas en la lactancia temprana; Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias. (16) 228 - 236. http://kogi.udea.edu.co/revista/16/16-3-3.pdf

Gerber ND, Nsahlai I V, Bonsi M L K and Gous R M 2000 Ruminal degradability and intestinal digestion of eight plant protein supplements used in ruminant diets; South African Journal of Animal Science. (30, Supplement 1) 51-52. http://www.sasas.co.za/publications/gerberconntl.pdf?sID=

Grant R 1996 Protein and carbohydrate nutrition of high producing dairy cows; University of Nebraska Cooperative Extension; http://ianrpubs.unl.edu/dairy/g1027.htm

Grummer R R 1995 Impact of changes in organic nutrient metabolism on feeding the transition dairy cow; Journal of Animal Science. (73) 2820 - 2833. http://jas.fass.org/cgi/reprint/73/9/2820

Hanigan M D 2005 Quantitative aspects of ruminant splanchnic metabolism as related to predicting animal performance. Animal Science. Vol. 80 23 - 32.

Hanigan M D, Calvert C C, Depeters E J, Reis L and Baldwin R L 1991 Whole blood and plasma amino acid uptakes by lactating bovine mammary glands; Journal of Dairy Science. (74) 2484 - 2490. http://jds.fass.org/cgi/reprint/74/8/2484

Harris PM and Lobley G E 1991 Amino acid and energy metabolism in the peripheral tissues of ruminants; In: Physiological aspects of digestion and metabolism in ruminants. (Tsuda, T., Sasaki, Y. and Kawashima, R., Ed.) , 201-230. Academic Press, London.

Harris P M, Waghorn G C and Lee J 1990 Nutritional partitioning of growth for productive gain; Proceedings of the New Zealand Society of Animal Production. 50 81 - 90. Citados por Annison E F and Bryden W L 1999 Perspectives on ruminant nutrition and metabolism. II. Metabolism in ruminant tissues; Nutritional Research Reviews. (12) 147 - 177.

Haussinger D 1983 Hepatocyte heterogeneity in glutamine and ammonia metabolism and the role of intercellular glutamine cycle during ureogenesis in perfused rat liver; European Journal of Biochemistry (133) 269 - 275. Citado por Reynolds CK 1992 Metabolism of nitrogen compounds by ruminal live;. Journal of Nutrition. (122) 850 - 854.

Herrera-Saldaña R, Gómez-Alarcón R, Torabi M and Huber J T 1990 Influence of synchronizing protein and starch degradation in the rumen on nutrient utilization and microbial protein synthesis; Journal Dairy Science. (73) 142-148. http://jds.fass.org/cgi/reprint/73/1/142

HuntingtonG B 1986 Uptake and transport of nonprotein nitrogen by ruminant gut. Federation Proceedings. 45: 2272 - 2276.

HuntingtonG B and Archibeque S L 1999 Practical aspects of urea and ammonia metabolism in ruminants; Proceedings of the American Society of Animal Science.11 p; http://www.asas.org/JAS/symposia/proceedings/0939.pdf

Jonker J S, Kohn R A and Erdman R A1998 Using milk urea nitrogen to predict nitrogen excretion and utilization efficiency in lactating dairy cows; Journal of Dairy Science. (81) 2681 - 2692. http://jds.fass.org/cgi/reprint/81/10/2681

Julliard J H, Godinot C, Gautheron C 1971 Some modifications of the kinetic properties of bovine liver glutamate dehydrogenase (NAD(P)) covalently bound to a solid matrix of collagen; FEBS letters. (14) 185 - 188. http://www.sciencedirect.com/science?_ob=MImg&_imagekey=B6T36-447N68D-1VN-1&_cdi=4938&_user=10&_orig=search&_coverDate=04%2F30%2F1971&_qd=1&_sk=999859996&view=c&wchp=dGLbVtz-zSkzV&md5=fb5f554f12a8e089ea0666962ae9a823&ie=/sdarticle.pdf

Katz N R 1992 Metabolic heterogeneity of hepatocytes across the liver acinus; Journal of Nutrition. (122) 843 - 849.

King M W 2000 Nitrogen metabolism and the urea cycle http://web.indstate.edu/thcme/mwking/nitrogen-metabolism.html

Knowlton K F 1998 Environmental implications of nutrition and feeding management; Department of Dairy Science, Virginia Tech. http://www.dascvt.edu/nutritioncc/ knowlton98.pdf  

Komaragiri M V and Erdman R 1997 Factors affecting body tissue mobilization in early lactation dairy cows. 1. Effect of dietary protein on mobilization of body fat and protein; Journal of Dairy Science. (80) 929 - 937. http://jds.fass.org/cgi/reprint/80/5/929

Korhonen M, Vanhatalo A and Huhtanen P 2002 Effect of protein source on amino acid supply, milk production, and metabolism of plasma nutrients in dairy cows fed grass silage; Journal of Dairy Science. (85) 3336 - 3351. http://jds.fass.org/cgi/reprint/85/12/3336

Lapierre H, Berthiaume R, Raggio G, Thivierge M C, Doepel L, Pacheco D, Dubreuil P and Lobley G E 2005 The route of absorbed nitrogen into milk protein. Animal Science. Vol. 80 11 - 22.

Lapierre H, Berthiaume R, Thivierge M C, Patton R A and Stevenson M J. 2000. Basic amino acid reseach leads to better recommendations. Feedstuffs. August 14. 11 - 19.

Lapierre H and Lobley G E 2001 Nitrogen recycling in the ruminant; Journal of Dairy Science. (84, Suppl) E223 - E236. http://www.adsa.org/jds/abs/2001/jds_es223.htm

Leng R A, Dellow D and Waghorn G 1986 Dynamics of large ciliate protozoa in the rumen of cattle fed on diets of freshly cut grass; British Journal of Nutrition. (56) 455- 462. http://docstore.ingenta.com/cgi-bin/ds_deliver/1/u/d/ISIS/25346354.1/cabi/bjn/1986/00000056/00000002/art00015/1D36AEA4EE7D9E181137530936891C9840BCA00E7E.pdf?link=http://www.ingentaconnect.com/error/delivery&format=pdf

Leng R A and Nolan J V 1984 Nitrogen metabolism in the rumen; Journal of Dairy Science. (67) 1072-1089.

Lindsay D B 1993 Metabolism in of the portal-drained viscera; In Quantitative aspects of ruminant digestion and metabolism. pp. 267 - 289. (J M France editor). Cambridge CAB International.

Lobley G E 1993 Species comparisons of tissue protein metabolism: effects of age and hormonal action; Journal of Nutrition. (123) 337 - 343.

Lobley G E 2003 Protein turnover - what does it mean for animal production?; Canadian Journal of Animal Science. (83) 327 - 340.

Lobley G E, Connell A, Milne E, Newman A and Ewing T A 1994 Protein synthesis in splanchnic tissue of sheep offered two levels of intake; British Journal of Nutrition. (71) 3 - 12. http://docstore.ingenta.com/cgi-bin/ds_deliver/1/u/d/ISIS/25346651.1/cabi/bjn/1994/00000071/00000001/art00005/8F90C777A24327961137531397D69F216FB24F81F3.pdf?link=http://www.ingentaconnect.com/error/delivery&format=pdf

Lobley G E and Lapierre H 2001 Nitrogen (N): from mouth to milk; In: Proceedings of the 16th annual southwest nutrition and management conference. Phoenix, Arizona. February 22 to 23. pg 81 - 99.

Londoño E, Toro M M, y Santa N I 2005 Calidad de la leche cruda de los proveedores del oriente antioqueño. Monografía de grado, Especialización en Aseguramiento de la Calidad Microbiológica de los Alimentos. Institución Universitaria Colegio Mayor de Antioquia. 45 p.

Luiking Y C, Hallemeesch M M, Vissers Y L J, Lamers W H and Deutz N E P 2004 In vivo whole body and organ arginine metabolism during endotoxemia (sepsis) is dependent on mouse strain and gender. Journal of Nutrition. Vol. 134 2768S - 2774S. http://www.nutrition.org/cgi/reprint/134/10/2768S

Mahanna B 1997 Dairy Cow Nutritional Guidelines - Part I; Pioneer Hi-Bred International, Inc. http://www.pioneer.com/usa/nutrition/ vettext1.htm

McBride B W and Kelly J M 1990 Energy cost of absorption and metabolism in the ruminant gastrointestinal tract and liver: a review; Journal of Animal Science. (68) 2997 - 3010. http://jas.fass.org/cgi/reprint/68/9/2997

Mejia D y Vargas E 2004 Efecto de diferentes regímenes de alimentación en vacas Holstein lactantes sobre el flujo de proteína microbiana al duodeno. Trabajo de grado de Zootecnia, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Medellín. 31 p.

Meneses L 2005 Evaluación del contenido de proteína y la calidad higiénica de la leche, proveniente de hatos localizados en dos regiones lecheras de Antioquia. Informe de Pasantía de Zootecnia, Departamento de Producción Animal, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Medellín. 20 p.

Messman M A, Weiss W P and Erickson D O 1992 Effects of nitrogen fertilization and maturity of bromegrass on nitrogen and amino acids utilization by cows; Journal of Animal Science. (70) 566 - 575. http://jas.fass.org/cgi/reprint/70/2/566

Ministerio de Agricultura y Desarrollo Social 1999 Acuerdo Nacional de Competitividad de la Cadena Láctea. 123 pg. http://www.agrocadenas.gov.co/documentos/documentos_iica/No 12.pdf

Minson D J 1990 Forage in ruminant nutrition; Academic Press. 482 p.

Moharrery A and T K Das 2001 Correlation between microbial enzyme activities in the rumen fluid of sheep under different treatments; Reproduction and Nutrition Development. (41) 513-529 http://www.edpsciences.org/articles/rnd/pdf/2001/06/04.pdf?access=ok

Moorby J M and Theobald V J 1999 Short communication: The effect of duodenal ammonia infusions on milk production and nitrogen balance of the dairy cows; Journal of Dairy Science. (82) 2440 - 2442. http://jds.fass.org/cgi/reprint/82/11/2440

Monsalve F 2004 Comparación de dos métodos para estimar la digestibilidad posruminal de la proteína cruda del pasto kikuyo (Pennisetum clandestinum). Trabajo de grado de Zootecnia, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Medellín. 18 p.

Montoya N F y Pino I D 2002 Efecto de la suplementación con diferentes niveles de papa sobre algunos parámetros productivos y metabólicos en vacas lactantes; Trabajo de grado de Zootecnia, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Medellín. 50 p.

Montoya N F, Pino I D y Correa H J 2004 Evaluación de la suplementación con papa (Solanum tuberosum) durante la lactancia en vacas Holstein. Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias. Vol. 17 241 - 249. http://kogi.udea.edu.co/revista/17/17-3-4.pdf

Mustafa A F, Qiao S Y, Thacker P A, Mckinnon J J, Christensen D A and Chaplin R K 2000 Assessmentrof the value of cannulated pigs for measuring intestinal protein digetibility of ruminal undegrade protein of canola meal; Canadian Journal of Animal Science. (80) 519 - 522.

Mutsvangwa T, Buchanan-Smith J G, McBride BW 1999 Effects of in vitro addition of ammonia on the metabolism of 15N-labelled amino acids in isolated sheep hepatocytes; Canadian Journal of Animal Science. (79) 321 - 326.

National Research Council 2001 The nutrient requirement of dairy cattle. Seventh edition; National Academy Press, Washington, D. C. 381 p.

NKJ-NJF (Norsdisk Kontaktorgan For Jordbrugsforskning / Nordikse Jordbrugsforskeres Forening) 1985 Protein evaluation for ruminants. Proc. NKJ-NJF Seminar No. 72. Copenhagen; Acta Agriculture Scandinavica. (Suppl. 25).

Oba M, Baldwin VI R L, Owens S L, and Bequette B J 2004 Urea synthesis by ruminal epithelial and duodenal mucosal cells from growing sheep. Journal of Dairy Science. Vol. 87 1803-1805. http://www.dairy-science.org/cgi/reprint/87/6/1803

Ørskov E R and McDonald I 1979 The estimation of protein degradability in the rumen from incubation measurements weighted according to rate of passage; Journal of Agriculture Science. (92) 499 - 503.

Osorio F 1996 Efecto de la condición corporal sobre la producción y reproducción en ganado lechero; En: Seminario Avances Tecnológicos de la producción Lechera. Rionegro, Ant. Asociación Holstein, Seccional Antioquia y Finca S. A. 21p.

Osorio F 1999 Efecto de la dieta sobre la composición de la leche; En: Memorias, I Seminario Internacional sobre avances en nutrición y alimentación animal, Medellín, marzo 18 - 19.

Osorio F 2004 Efecto del manejo alimentario sobre el sistema especializado de producción lechera. En: memorias Seminario Nacional de Lechería Especializada: Bases Nutricionales y su Impacto en la Productividad. Eventos y Asesorías Agropecuarias, Auditorio de la Salud, Hospital General de Medellín, Septiembre 1 y 2 141 - 152.

Overton T R, Drakley J K, Ottemann-Abbamonte C J, Beaulieu A D and Clark J H 1998 Metabolic adaptation to experimentally increased glucose demand in ruminants; Journal of Animal Science. (76) 2938 - 2946. http://jas.fass.org/cgi/reprint/76/11/2938

Parker D S, Lomax M A, Seal C J and Wilton J C 1995 Metabolic implications of ammonia production in the ruminant; Proceedings of the Nutrition Society. (54) 549 - 563. Citado por Huntington G B and Archibeque S L 1999 Practical aspects of urea and ammonia metabolism in ruminants; Proceedings of the American Society of Animal Science.11 p; http://www.asas.org/JAS/symposia/proceedings/0939.pdf

Pérez J 2000 Cooperativa COLANTA exportadora; Cooperativa COLANTA, Informe y balance 1999.

Read J W and Fulkerson W J 2003 Managing kikuyu for milk production; Agfact P2.5.3, third edition. State of New South Wales, NSW Agriculture. 4 p. http://www.agric.nsw.gov.au/reader/past-management/p253.pdf?MIvalObj=12921&doctype=document&MItypeObj=application/pdf&name=/p253.pdf

Reynolds C K 1992 Metabolism of nitrogen compounds by ruminal liver; Journal of Nutrition. (122) 850 - 854.

Reynolds C K, Harmon D L and Cecava M J 1994 Absortion and delivery of nutrients for milk protein synthesis by portal drained viscera; Journal of Dairy Science. (77) 2787 - 2808.

Reynolds C K, Huntington G B, Tyrrel H F and Reynolds P J 1988 Net portal-drained visceral and hepatic metabolism of glucose, L-lactate, and nitrogenous compounds in lactating Holstein cows; Journal of Dairy Science. (71)1803 - 1812.

Rodríguez D 1999 Caracterización de la respuesta a la fertilización en producción y calidad forrajera en los valles de Chiquinquira y Simijaca (Estudio de caso); Trabajo de grado de Zootecnia, Departamento de Producción Animal, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Bogotá.

Rueda S y Taborda L 2003 Estimación del flujo de proteína microbial hacia el duodeno a partir de la concentración de alantoína en la orina de vacas lactantes en un hato lechero de Antioquia; Trabajo de grado de Zootecnia, Departamento de Producción Animal, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Medellín. 51 p.

Rulquin H, Rigout S, Lemosquet S, and Bach A 2004 Infusion of glucose directs circulating amino acids to the mammary gland in well-fed dairy cows. Journal of Dairy Science. Vol. 87 340 -349. http://jds.fass.org/cgi/reprint/87/2/340

Russell J B, O'Connor J J D, Fox D G, Van Soest P J and Sniffen C J 1992 A Net Carbohydrate and Protein System for Evaluating Cattle Diets: I. Ruminal Fermentation; Journal of Animal Science. (70) 3551- 3561. http://jas.fass.org/cgi/reprint/70/11/3551

Santos F A P, Santos J E P, Theurer C B and Huber J T 1998 Effects of Rumen-undegradable protein on dairy cow performance: A 12-year literature review; Journal of Dairy Science. (81) 3182 - 3213. http://jds.fass.org/cgi/reprint/81/12/3182

Seal C J and Parker D S 2000 Inter-organ amino acid flux; En: D`Mello, J. P. F. Farm animal metabolism and nutrition. CABI Publising, London, UK. Pg 49 - 63.

Soto S y Saldarriaga C 2004 Efecto de dos edades de rebrote del pasto kikuyo (Pennisetum clandestinum) sobre el balance de nitrógeno en vacas Holstein de alta producción. Trabajo de grado de Zootecnia, Departamento de Producción Animal, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Medellín. 30 p.

Soto C P y Valencia A 2004 Efecto de la edad de corte y del nivel de fertilización nitrogenada sobre la valoración nutricional y la degradación de la proteína del pasto kikuyo (Pennisetum clandestinum, Hochst). Trabajo de grado de Zootecnia, Departamento de Producción Animal, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Nacional de Colombia, Medellín. 30 p.

Stern M D, Bach A and Calsamiglia S 1997 Alternative techniques for measuring nutrient digestion in ruminants; Journal of Animal Science. (75)2256-2276. http://jas.fass.org/cgi/reprint/75/8/2256

Stokes S 1997 Balancing carbohydrates for optimal rumen function and animal health; Western Canadian Dairy Seminar; http://www.wcds.afns.ualberta.ca/Proceedings/1997/ch06-97.htm

Tagari H and Bergman E N 1978 Intestinal disappearance and portal blood appearance of amino acids in sheep; Journal of Nutrition. (108) 790 - 803.

Tagari H, Webb Jr K, Theurer B, Huber T, DeYoung D, Cuneo P, Santos J E P, Simas J, Sadik M, Alio A, Lozano O, Delgado-Elorduy A, Nussio L, Nussio C, and Santos F 2004 Portal drained visceral flux, hepatic metabolism, and mammary uptake of free and peptide-bound amino acids and milk amino acid output in dairy cows fed diets containing corn grain steam flaked at 360 or steam rolled at 490 g/L. Journal of Dairy Science. Vol. 87 pp 413-430 http://jds.fass.org/cgi/reprint/87/2/413

Tedeschi L O, Pell A N, Fox and D G Llames C R 2001 The amino acid profiles of the whole plant and of four plant residues from temperate and tropical forages; Journal of Animal Science. (79) 525 - 532. http://jas.fass.org/cgi/reprint/79/2/525

Třináctý J, Šimek M and Homolka P 1999 Nylon capsule method and alfalfa hay crude protein digestibility evaluation; Animal Feed Science and Technology. (79) 269-278.

Valadares R F D, Broderick G A, Valadares-Filho S C and Clayton M K 1999 Effect of replacing alfalfa silage with high moisture corn on ruminal protein synthesis estimated from excretion of total purine derivatives; Journal of Dairy Science. (82) 2686 - 2696. http://jds.fass.org/cgi/reprint/82/12/2686

Vandehaar M J 1998 Efficiency on nutrient use and relationship to profitability on dairy farms; Journal of Dairy Science. (81) 272 - 282. http://jds.fass.org/cgi/reprint/81/1/272

Van der Walt J G 1993 Nitrogen metabolism of the ruminant liver; Australian Journal of Agricultural Research. (44) 381 - 403.

Van Horn H H, Wilkie A C, Powers W J and Nordstedt R A 1994 Components of dairy manure management systems; Journal of Dairy Science. (77) 2008 - 2030. http://jds.fass.org/cgi/reprint/77/7/2008

Van Soest P J 1994 Nutritional ecology of the ruminant; Cornell University Press. 476 p.

Van Vuuren A, Tamminga S and Ketelaar R 1991 In saco degradation of organism matter and crude protein of fresh grass (Lolium perenne) in the rumen of grazing dairy cows; The Journal of Agriculture Science. (116) 429 - 436.

Vaughan J M, Bertrand J A, Jenkins T C and Pinkerton B W 2002 Effects of feeding Time on Nitrogen Capture by Lactating Dairy Cows Grazing Rye Pasture; Journal of Dairy Science. (85)1267 - 1272. http://jds.fass.org/cgi/reprint/85/5/1267

Verbic J 2002 Factors affecting microbial protein synthesis in the rumen with emphasis on diets containing forages; Viehwirtschaftliche Fachtagung, BAL Gumpenstein. (29) 1- 6.

Waterlow J C 1999  The mysteries of nitrogen balance; Nutrition Research Reviews. (12) 25 - 54. http://docstore.ingenta.com/cgi-bin/ds_deliver/1/u/d/ISIS/25340948.1/cabi/nrr/1999/00000012/00000001/art00003/6BCA68819D8191F1113752210671575143E735050A.html?link=http://www.ingentaconnect.com/error/delivery&format=html

Webb K E Jr 1990 Intestinal absorption of protein hydrolysis products: a review; Journal of Animal Science. (68) 3011 - 3022. http://jas.fass.org/cgi/reprint/68/9/3011

Wu G and Morris S M Jr 1998 Arginine metabolism: nitric oxide and beyond; Biochemical Journal. (336) 1-17. http://www.pubmedcentral.gov/picrender.fcgi?artid=1219836&blobtype=pdf

Zapata F 2000 Kikuyo; Especies Forrajeras Versión 1.0. Agrosoft Ltda. Colombia. 18 p.

Received 15 December 2005; Accepted 4 January 2006; Published 23 March 2006

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